一种全程定量检测C-反应蛋白的荧光免疫层析方法及其试剂盒

摘要

本发明公开了一种全程定量检测C-反应蛋白(CRP)的荧光免疫层析方法及其试剂盒。本发明的全程定量检测CRP荧光免疫层析方法是利用量子点的优良荧光特性，结合双色标记技术及免疫层析技术，在优化试纸条各组成部件基础上，实现的荧光定量检测。与常规胶体金免疫层析方法相比，本发明具有标记稳定性好、非特异性低、灵敏度高、线性范围宽以及定量准确的优势。本发明试剂盒可对CRP进行全程定量，即可同时对感染性疾病、抗生素疗效，及心脑血管疾病进行预测评估，适用于各级医院，特别有助于在基层医院及诊所的广泛推广。

主权项

一种全程定量检测C‑反应蛋白的荧光免疫层析方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1)用化学交联或生物分子间特异性作用将C‑反应蛋白的特异性抗体连接到量子点表面，得到抗体修饰的量子点，所述抗体修饰的量子点的发射波长范围为550～1300nm；步骤2)将步骤1)得到的抗体修饰的量子点固定在标记垫上，且标记垫上同时固定有质控分子修饰的量子点，所述质控分子修饰的量子点的发射波长与步骤1)得到的抗体修饰的量子点的发射波长不同，且波长范围为550～1300nm，在层析膜上分别设有定量带和质控带，其中质控带固定有能与所述质控分子特异性结合的生物分子，定量带固定有对应C‑反应蛋白的与步骤1)所述特异性抗体不同抗原决定簇的特异性抗体；步骤3)以样品垫、标记垫、层析膜、吸水垫和底板构建成荧光免疫层析试纸条，其中所述层析膜为弱荧光层析膜，底板具低荧光特性；步骤4)试纸条免疫层析后，检测定量带和质控带的荧光信号强度，并以质控带荧光信号强度校正定量带的荧光信号强度，进而实现C‑反应蛋白的定量检测。