天然芸苔素内酯的生物酶解制备方法

摘要

本发明涉及一种生物酶的制备方法，具体为天然芸苔素内酯的生物酶制备方法。本方法包括：接种发酵，压滤，超滤，乳化，酶解，萃取，压滤，浓缩，树脂吸附，浓缩结晶，真空吸滤，干燥包装步骤。本发明工艺方法操作简便，生产过程能耗低，产品纯度高，环保节约。

主权项

天然芸苔素内酯的生物酶解制备方法，其特征在于经过下列步骤：A、发酵产酶培养基120℃灭菌30min，冷却至28℃接入假单胞菌种子，28～30℃搅拌45r/min，通气培养，发酵时间为76h，其中培养基组成为：油脂0.75％，硝酸钠0.2％，酵母膏0.5％，磷酸氢二钾0.2％，pH7.5；B、反应发酵液加入絮凝剂再离心除去菌体，获得粗酶液；C、粗酶液经中空纤维系统超滤浓缩，同时去掉无机盐及部分小分子物质，得到2000～2500U/L的浓缩酶液；D、将浓缩酶液加到分散的蜂蜡乳化液中，调pH7.0～8.5，搅拌，升温到30～40℃，定向水解不少于3h，水解接近终点时，加入适量的乙醇；E、酶解液经乙醇萃取，板框压滤机过滤，浓缩罐浓缩后，采用树脂吸附柱分离纯化，真空浓缩，结晶，得到99％芸苔素内酯产品。