一种快速检测食品中的邻苯二甲酸二丁酯的方法

摘要

本发明公开了一种快速检测食品中的邻苯二甲酸二丁酯的方法，包括以下步骤：a：抑制曲线的建立步骤、b：样品的检测步骤，本发明与现有技术相比，具有灵敏度高、快速、特异性强，方法简单、耗时短，适合环境污染物DBP的快速分析，而且对邻苯二甲酸酯的测定有着重要意义。

主权项

一种快速检测食品中的邻苯二甲酸二丁酯的方法，包括以下步骤：a：抑制曲线的建立步骤：在建立邻苯二甲酸二丁酯的抑制曲线之前，先配制不同浓度的标准品：邻苯二甲酸二丁酯标准品用1‑2mL的无水乙醇溶解后，用稀释液稀释至一系列浓度，分别为1100ng/mL、366ng/mL、122ng/mL、40ng/mL、13ng/mL、4.5ng/mL、1.5ng/mL、0.5ng/mL、0.16ng/mL、0.055ng/mL、0.018ng/mL、0.006ng/mL。竞争时加入这一系列浓度的标准液，测定结果的平均值经过Origin6.0软件处理后绘制成抑制曲线；(1)包被步骤：用浓度为5μg/mL的邻苯二甲酸二丁酯包被抗原包被96孔酶标板，每孔100μL，放置培养箱37℃温育2h后，从培养箱内取出，甩掉孔内溶液，再用洗涤液洗涤并甩干，每次洗涤3‑5min，总共洗涤3次；(2)封闭步骤：在包被好的酶标准版中加入1％卵清蛋白溶液，每孔150μL，37℃温育30min后，甩掉孔内溶液，再用洗涤液洗涤并甩干，每次洗涤3‑5min，总共洗涤3次；(3)竞争步骤：每孔加入50μL邻苯二甲酸二丁酯标准溶液和50μL荧光标记的邻苯二甲酸二丁酯抗体，37℃下温育2.5h后，从培养箱内取出，甩掉孔内溶液，再用洗涤液洗涤并甩干，每次洗涤3‑5min，总共洗涤3次；(4)检测步骤：用多功能酶标仪测定各孔在激发波长为485nm，发射波长为528nm时的荧光强度；b：样品的检测步骤除(3)竞争步骤：每孔加入50μL样品溶液和50μL的荧光标记的邻苯二甲酸 二丁酯抗体，37℃下温育2.5h后，从培养箱内取出，甩掉孔内溶液，再用洗涤液洗涤并甩干，每次洗涤3‑5min，总共洗涤3次；外，其余与a：抑制曲线的建立步骤相同。