利用微流控芯片连续高速分析单细胞内容物的方法

摘要

本发明提供了一种结构简单的连续高速分析单细胞内物质的微流控芯片和操作方法。本发明在型微流控芯片进样通道的二侧各加一条鞘流通道，通过调节储液池之间的静压力差，使细胞悬液和鞘流液同时从样品池和鞘流液池中流出，在鞘流的作用下，细胞悬液中的单细胞排成一行，依次从进样通道进入分离通道，并在运行过程中与溶膜剂接触、在分离通道入口处于快速溶膜，在分离通道二端所产生的电场力的作用下，溶膜后的细胞内容物全部进入分离通道被连续、高速地分离，激光诱导荧光检测。由于进入分离通道中的溶液是鞘流液和细胞悬液中生理盐水的混合溶液，本发明还可以大大降低进入分离通道中生理盐水的浓度，显著减少电泳时由焦耳热导致的谱带增宽。

主权项

一种利用利用微流控芯片装置连续高速分析单细胞内容物的方法，所述装置主要包括微流控芯片、直流电源和激光诱导荧光检测器，所述微流控芯片上设置有呈十字相交的进样通道和分离通道，在进样通道两侧，各设置有一条鞘流通道，两条鞘流通道与进样通道沿进样液流向相交于十字交叉点上游，与十字交叉点距离为10～1000微米，进样通道一端设置样品池、另一端设置样品废液池，分离通道一端设置缓冲液池、另一端设置缓冲液废液池，两条鞘流通道另一端均设置有鞘流液池；所述方法包括：在缓冲液池和缓冲液废液池中加入电泳缓冲液，鞘流液池加入溶有溶膜剂的电泳缓冲液即鞘流液，样品池中加入待测细胞悬液，通过调节样品废液池和其他储液池之间的静压力差，使细胞悬液和鞘流液同时从样品池和鞘流液池流出，细胞悬液和鞘流液沿通道汇合后自动排成一行，形成单细胞流，细胞在运行过程中与加在鞘流液中的溶膜剂接触并快速溶膜于分离通道入口处，在分离通道二端分离电场所产生的电场力的作用下，溶膜后的细胞内容物全部进入分离通道被连续、高速地分离，分离后细胞内容物中各组份流经设置于分离通道上的激光诱导荧光检测器，通过检测荧光强度对细胞内容物中各组份的含量进行分析。