超顺磁性氧化铁标记的人胰腺癌细胞株及标记方法与应用

摘要

一种超顺磁性氧化铁标记的人胰腺癌细胞株，其细胞内含有超顺磁性氧化铁。一种用超顺磁性氧化铁标记人胰腺癌细胞株的方法，采用多聚赖氨酸作为转染介质，通过含超顺磁性氧化铁-多聚赖氨酸的标记液与细胞共同孵育，步骤如下：(1)标记液的配制；(2)人胰腺癌细胞株的培养；(3)人胰腺癌细胞株的标记。所述超顺磁性氧化铁标记的人胰腺癌细胞株可在磁共振成像中应用，在构建胰腺癌动物模型中应用。

主权项

一种超顺磁性氧化铁标记的人胰腺癌细胞株，所述人胰腺癌细胞内含有超顺磁性氧化铁，其特征在于标记方法如下：(1)标记液的配制以超顺磁性氧化铁纳米粒子、质量浓度0.1％多聚赖氨酸储备液、含新生牛血清的1640培养液为原料，将所述原料在常压、室温下混合均匀即形成标记液，所述标记液中，超顺磁性氧化铁纳米粒子与0.1％多聚赖氨酸储备液的体积比为3∶1，铁离子的浓度至少为168μg/ml；所述超顺磁性氧化铁纳米粒子是以Fe3O4和Fe2O3纳米结晶为磁性核心，外面包被了碳氧葡聚糖的纳米粒子，粒径为45nm～60nm；(2)人胰腺癌细胞株的培养将细胞浓度0.5×106/ml～1×106/ml的人胰腺癌细胞悬液种植于培养瓶中，并加入含新生牛血清的1640培养液，然后将所述培养瓶放入CO2孵箱中，于37℃进行培养，当人胰腺癌细胞铺满培养瓶瓶底的80％后换液；(3)人胰腺癌细胞株的标记将步骤(1)配制的标记液加入步骤(2)培养获得的培养液中形成标记体系，所述标记液的加入量以标记体系中铁离子的浓度达到21μg/ml～42μg/ml为限，将标记体系放入CO2孵箱中，于37℃培养20小时～24小时，培养时间届满后将标记体系从CO2孵箱中取出，依次进行弃培养液、用PBS液冲洗、用胰酶消化离心、用含新生牛血清的1640培养液重悬的操作，即获得超顺磁性氧化铁标记的人胰腺癌细胞株。