一种实时荧光RT-PCR检测H5亚型禽流感病毒的试剂盒

摘要

本发明涉及一种实时荧光RT-PCR检测试剂盒，特别是涉及以一步法实时荧光逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术早期、快速诊断H5亚型禽流感病毒感染的试剂盒。本试剂盒具有很高的灵敏度和特异性，通过本发明的试剂盒实现对咽喉拭子、泄殖腔拭子、肌肉或脏器样本、血清或血浆等样品中的H5亚型禽流感病毒的快速早期检测和定量分析。

主权项

一种检测样品中H5亚型禽流感病毒存在的试剂盒，该试剂盒包括：(1)分别装有RNA提取液、RT‑PCR扩增反应液、阴性质控品、阳性质控品和定量参考品并加盖密封的多个试剂瓶或管，和(2)分隔并集中包装这些试剂瓶或管的包装盒，其中RT‑PCR扩增反应液包括耐热DNA聚合酶、逆转录酶、RNA酶抑制剂、脱氧核糖核苷三磷酸、正向引物、反向引物，两末端分别结合有荧光报告基团和荧光淬灭基团的寡核苷酸探针，其特征在于RT‑PCR扩增反应液中用于靶多核苷酸扩增的正向和反向引物的序列分别为：正向引物AIV‑H5‑F：5’‑GGAGTGGATACGCTGCAGACAAAG‑3’反向引物AIV‑H5‑R：5’‑TTATTAAATTCCCTTCCAACGGCCT‑3’；RT‑PCR扩增反应液中所使用的寡核苷酸探针AIV‑H5‑P的序列为：5’‑TCAACTCGATCATTGACAAAATGAACACTCAG‑3’。