铁皮石斛蒴果快繁育苗方法

摘要

本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种珍稀濒危中药材铁皮石斛蒴果的快繁育苗方法。本发明的目的在于利用现代生物技术，在不破坏野生石斛资源的前提下，快速扩繁优质铁皮石斛种苗。一颗铁皮石斛蒴果通过5～6月的组培培养可快繁培育出10万株以上石斛组培苗，炼苗移栽成活率达到96％以上。本发明了提高铁皮石斛种苗的扩繁速度和生产量，变野生为家种，实施人工大面积栽培，对濒危紧缺药用植物资源再生和持续利用具有十分积极的影响。

主权项

一种铁皮石斛蒴果快繁育苗方法，其特征在于该方法在不破坏野生石斛资源前提下，能够快速培育出铁皮石斛试管苗，包括下列步骤完成：①　将新鲜的未裂开的果实或储存的种子经过消毒处理程序，播入1／2MS基本培养基+NAA（a‑萘乙酸）0.01~0.5㎎／L+土豆汁15％（V/V)+蛋白胨0.1~5g／L+琼脂5g／L的培养基里，进行种子萌发培养，培养温度22~25℃，每日光照10—12小时，光照1800~2500lx, 10~15天种胚开始萌动，15~25天种胚膨大，逐渐萌发形成绿色的原球茎；②　将原球茎转入MS基本培养基+BA（6‑苄基腺嘌呤）0.01~0.5㎎／L+NAA(a‑萘乙酸）0.01~0.5㎎／L+土豆汁20％（V／V)+蛋白胨0.1~5g／L+琼脂5g/L的培养基里进行原球茎增殖、分化培养，25天观察到瓶内原球茎重叠堆积在培养基中，并有叶原茎和小苗出现，将小苗转入同样的培养基继续培养2个月，将小苗培养成中苗，苗高3㎝同时伴随有部分新的原球茎产生；③　将中苗转入MS基本培养基+NAA（a‑萘乙酸）0.01~0.5㎎／L+香蕉汁15％（V/V)+土豆汁10％（V/V)+琼脂6g/L+蛋白胨0.1~5g／L的壮苗培养基里面，继续培养，1.5个月能够培养出5㎝高以上的大苗，大苗能够出瓶炼苗、移栽。