一种含重复序列基因的合成方法

摘要

本发明公开了一种含重复序列基因的合成方法，为采用重叠延伸PCR的方法人工合成基因，所述重叠延伸PCR时所采用的引物满足下列要求：相邻的重复序列设计在同一条引物中或者相距较近的重复序列在不同的引物中呈直接重复的形式，而且重复不能出现在引物的5’和3’端。本发明的含重复序列基因的合成方法可有效避免PCR出现缺失的情况，大大提高了含重复序列基因的合成效率。

主权项

一种重叠延伸PCR引物的设计方法，所述重叠延伸PCR引物用于合成含有重复序列的基因，其特征在于：当所述基因含有相邻的重复序列时，将重叠延伸PCR引物设计成：所述相邻的重复序列包含在同一条引物中，且所述相邻的重复序列不能出现在该引物的5’和3’端；或者，当所述基因含有相距较近的重复序列时，将重叠延伸PCR引物设计成：重复序列在不同的重叠延伸PCR引物中呈直接重复的形式，且所述重复序列不能出现在引物的5’和3’端；所述相邻的重复序列是指：序列中正向重复序列或反向重复序列的重复单元之间至多间隔10个碱基；所述相距较近的重复序列是指：序列中正向重复序列或反向重复序列的重复单元之间间隔11‑80个碱基；所述重复序列在不同的重叠延伸PCR引物中呈直接重复的形式是指：无论对于正向重复序列或是反向重复序列，各重复单元均出现在不同的引物中，且包含重复单元的引物中，重复单元序列均相同；所述重复序列的重复单元为15‑30个碱基。