焦磷酸测序技术鉴别新城疫病毒强毒株与弱毒株的方法

摘要

本发明属于动物病原检测技术领域，涉及一种采用焦磷酸测序技术鉴别新城疫病毒强毒株与弱毒株的方法，先进行引物设计区分新城疫病毒强毒株与弱毒株的特异性引物及焦磷酸测序引物；再提取待测样品的核糖核酸，用特异性引物进行逆转录-聚合酶链式反应扩增，再进行琼脂糖凝胶电泳对扩增产物检测，若特异性引物扩增片段长度为268bp，则制备焦磷酸测序单链模板进行焦磷酸测序反应，最后根据扩增结果和焦磷酸测序结果判定是否含有新城疫病毒强毒株或弱毒株；本发明吸收了RT-PCR和DNA测序技术优势，用特异序列测定满足对分子诊断需要，使新城疫强毒株或弱毒株的鉴定结果可靠，方法快捷，测试准确。

主权项

一种用于焦磷酸测序技术鉴别新城疫病毒强毒株与弱毒株的引物，其特征在于：F基因上游引物：5’‑AAGCCCCCTTGGATGCATA‑3’，5’进行生物素标记；F基因下游引物：5’‑TCATGCACAGCCTCATTGG‑3’，F基因测序引物：5’‑CCAATAATGGCGCCT‑3’，扩增片段长度为268bp。