一种石斛多糖的分离纯化方法

摘要

一种石斛多糖的分离纯化方法，其工艺步骤是：原料→粉碎→过筛→脱脂→微波辅助溶剂萃取→酶提→过滤→水提→抽滤→真空浓缩→醇沉→离心分离→冷冻干燥→粗品→除蛋白→冷冻干燥→石斛多糖，本发明的技术效果是：提高了石斛多糖提取率，缩短提取时间、减少能耗、有效保存石斛多糖生物活性。

主权项

一种石斛多糖的分离纯化方法，以铁皮石斛药材为原料，其特征在于步骤如下：（1）将铁皮石斛原料粉碎后过筛得到40‑80目石斛粗粉；（2）将石斛粗粉用10‑30倍有机溶剂回流1‑4次，合并药渣；（3）上述药渣按固液重量比例1:15加水后进行微波辅助萃取30‑80秒得到萃取液，微波强度800W；（4）上述萃取液中按体积重量加入2%的纤维素酶进行酶解，调节萃取溶液pH至6.0，并将水温恒定在40℃，酶解时间为2小时；（5）酶解后过滤，向滤渣中按重量加入20‑30倍蒸馏水进行水提1‑2次；水提液抽滤，收集滤液，即得提取液；（6）将上述提取液进行真空浓缩，浓缩至原有体积的1/6，得到浓缩液；（7）向上述浓缩液中加入浓度95%的无水乙醇进行沉淀，至乙醇浓度达到80%，在温度9‑10℃下醇沉过夜；（8）将上述乙醇沉淀液进行离心分离和冷冻干燥，得到多糖粗品；冷冻干燥条件为：‑80℃预冻8hr后，‑80℃真空冷冻干燥6小时；（9）取上述多糖粗品，溶解于适量蒸馏水中，再加入体积比5:1的氯仿:正丁醇混合液中，搅拌混合后分层脱蛋白，收集上层液；重复操作4‑8次后，合并上层液，加入乙醇，冰浴放置至少12小时后过滤，将滤液沉淀、冷冻和干燥后得石斛多糖提取物。