一种食药用菌细胞组分的综合提取法及提取物的应用

摘要

一种食药用菌细胞组分的综合提取法及提取物的应用，属于天然产物提取及应用技术领域。本发明首先对食药用菌细胞进行酶法结合超声破壁，然后分别对提取液和菌渣采用不同顺序的水提、醇提和脂提工艺进行提取，获得纤维素、蛋白质、核酸、多糖、脂肪酸等多种营养组分和生物活性组分。本发明采用先破壁后提取的方案，从而显著提高了食药用菌细胞组分的提取率。本发明对提取液采用水提、醇提、脂提的顺序操作，对菌渣则采用脂提、醇提、水提的提取顺序，从而有效保留了提取组分的食用菌风味。本发明以食药用菌为原料综合提取多种细胞组分，进行深度开发，提取出的各组分均属天然物质，具有营养作用和保健药理作用的双重功效，可根据其特点衍生出多个产品。

主权项

一种食药用菌细胞组分的综合提取方法，其特征在于提取方法步骤如下：(1)破壁：将食药用菌原料经过干燥、粉碎至100～180目，粉碎后混入水中，加水量为食药用菌重量的10‑40倍，先酶法破壁，再超声破壁，破壁结束后，离心，使提取液与菌渣分离；A、酶法破壁：所用的酶为中性蛋白酶、纤维素酶和果胶酶，酶用量为食药用菌干粉重量的0.1％‑1.0％，温度50‑60℃，酶解时间1‑6h，pH4.0‑7.0；B、超声破壁：酶法处理后的料液在功率500～1000W、频率20～35KHz条件下超声处理10～60分钟，控制温度30℃以下；然后采用1000～4000转/分的转速进行离心分离，获得菌渣和提取液；(2)提取液的处理：C、酶水解：提取液进行酶水解，所用的酶选用木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、中性蛋白酶、大豆多肽水解酶的一种或几种，酶用量为食药用菌干粉重量的0.1％‑1.0％，温度50‑60℃，酶解时间1‑6h，pH4.0‑7.0；浓缩至适当体积；D、分步等电：用盐酸逐次分步调节等电点，在每一等电点所得之沉淀均采用8000转/分高速离心，在等电点pH6、pH5、pH4、pH3分别收集食药用菌的酸性蛋白质‑氨基酸混合物，在等电点pH2收集食药用菌核酸沉淀；上清液用NaOH溶液分步调pH8及pH10分别收集食药用菌的碱性蛋白质‑氨基酸混合物；E、醇沉：所余的上清液进一步浓缩至稀糖浆状后，加入3～5倍体积95％乙醇或无水乙醇，4000转/分离心或过滤收集多糖沉淀；F、脂提：提取完多糖后的滤液真空浓缩脱去乙醇，按体积比1∶1～2加入有机溶剂，室温搅拌萃取2‑3次，将有机相真空浓缩脱去溶剂，即得到以脂肪酸为主的食药用菌油；G、第二次醇沉：将步骤F萃取时所获水相进一步浓缩至干糖浆状，加入无水乙醇，沉淀过滤，获得单糖、双糖和低聚糖的混合糖；(3)菌渣的处理：H、粉碎或膨化：将菌渣烘干至水分5％以下，进行超微粉碎或膨化处理，膨化处理为采用挤压膨化机，在25～100kw条件下高温膨化10～50秒；I、脂提：然后加入有机溶剂萃取，离心，萃取液真空浓缩脱溶剂，得到含有脂肪酸和甾醇的脂溶性组分；J、醇提：脱脂后的菌渣，加入无水乙醇萃取，离心，萃取液真空浓缩脱乙醇，得到含有生物碱的醇溶性组分；K、水提：经脂提和醇提后的菌渣再加入热水浸提，浸提液经真空脱水，获得食药用菌水溶性组分；最后的菌渣为食药用菌纤维素，由于经过醇洗和水洗，已无有机溶剂味道，可作为食药用菌膳食纤维；步骤(2)‑F及步骤(3)‑I中脂提工艺所使用的有机溶剂选用石油醚、丙烷、丁烷、正己烷、正戊烷、或异戊烷。