主权项 |
一种西索霉素发酵过程中补入种子的方法,它是以双种子发酵培养,生产较高和稳定的西索霉素发酵液,其特征在于包括如下步骤:1、单种子发酵制备:将上一级的种子经过培养合格后移入下一级种子罐中培养,最终移入发酵罐中,工序如下:1.1摇瓶种子的制备:摇瓶种子培养基经过灭菌冷却后,在无菌条件下,用接种针刮下斜面菌丝体于种子瓶中,置34±1℃摇床上培养40‑48小时后,下摇床备用;1.2一级种子的制备:一级种子培养基经过灭菌冷却后,在无菌条件下将摇瓶种子接入一级种子罐中34±1℃培养24‑36小时;1.3二级种子的制备:二级种子培养基经过灭菌冷却后,通过已灭菌过的移种管道将一级种子移入二级种子罐中培养,培养温度34±1℃,培养时间18‑24小时;1.4三级种子的制备:三级种子培养基经过灭菌冷却后,通过已灭菌过的移种管道将二级种子移入三级种子罐中培养,培养温度34±1℃,通气量1:1 v/v/min,培养时间18‑24小时;1.5发酵罐培养基的制备:发酵培养基经过灭菌冷却后,通过已灭菌过的移种管道将三级种子移入发酵罐中培养,培养温度34±1℃,通气量1:1 v/v/min,培养时间100‑120小时;2、备用种子的制备:间隔20‑24小时重复制备步骤1中所述1.1到1.4的各级种子的制备,将培养好的备用种子移入步骤1中所述工序1.5已发酵培养20‑24小时的发酵罐中再培养80‑100小时;3、半料培养基补入:上述步骤1中所述1.5中发酵液培养48小时后,补入半料培养;4、无菌水的补入:上述1中所述1.5中发酵液培养80小时后,补入无菌水。 |