碱基测序方法及试剂

摘要

本发明的课题是，提供除去了在焦磷酸测序中成为问题的背景光的因素，使用微量的DNA样品进行高灵敏度且简便的DNA序列分析的方法。本发明提供了核酸分析方法，其包括：在含有试样核酸的反应液中，以所述试样核酸为模板进行互补链合成的工艺；使所述互补链合成中生成的焦磷酸在丙酮酸磷酸二激酶的共存下与30～800μM AMP反应生成ATP的工艺；以所述ATP作为反应底物进行荧光素酶反应的工艺；检测所述荧光素酶反应中产生的化学发光来判定有无互补链合成的工艺。本发明还提供用于核酸分析的试剂盒。

主权项

一种核酸分析方法，其特征为，包括：在含有试样核酸的反应液中，以所述试样核酸为模板进行互补链合成的工艺；使所述互补链合成中生成的焦磷酸在丙酮酸磷酸二激酶的共存下与30～800μM AMP反应，而生成ATP的工艺；以所述ATP作为反应底物进行荧光素酶反应的工艺；检测所述荧光素酶反应中产生的化学发光，来判定有无互补链合成的工艺；其中，所述互补链合成工艺中，将对应于碱基AGTC的4种核酸底物或其衍生物的每一种顺次加入，进行互补链合成，基于所述互补链合成的有无进行试样核酸的测序；剩余的核酸底物或其衍生物在下一个核酸底物加入前进行酶分解。