通过花药培养获得矮牵牛再生植株的方法

摘要

本发明公开了一种通过花药培养获得矮牵牛再生植株的方法，依次包括以下步骤：A)、矮牵牛花蕾低温预处理和消毒；B)、将步骤A)所得的花蕾用镊子剥去花萼和花瓣，取出花药，将花药去净花丝后接种在诱导愈伤组织培养基上；C)、将步骤B)继代培养所得的愈伤组织转接到分化培养基上进行不定芽的分化；当所得的不定芽达到3～5cm时，停止分化培养；D)、将步骤C)所得的不定芽作为小苗转接到生根培养基上进行生根培养，直至小苗上长出至少3条且长度≥2cm的不定根；得可出瓶种植的种苗；上述步骤A)～D)均在无菌环境中进行。

主权项

通过花药培养获得矮牵牛再生植株的方法，其特征是依次包括以下步骤：A)、低温预处理和消毒：选取矮牵牛花蕾，并于3～7℃中进行低温预处理2～4天；低温预处理后进行消毒处理；B)、将步骤A)所得的花蕾用镊子剥去花萼和花瓣，取出花药，将花药去净花丝后接种在诱导愈伤组织培养基上；培养温度为25±1℃，培养条件为暗培养；每13～17天更换一次新鲜的诱导愈伤组织培养基，待愈伤组织形成后将愈伤组织转接到新鲜的诱导愈伤组织培养基上进行继代培养；继代培养至少2次；C)、将步骤B)继代培养所得的愈伤组织转接到分化培养基上进行不定芽的分化；培养室温度25±1℃，光照培养，光照强度为180～220μmol·m‑2·s‑1，光照时间为13～15h；当所得的不定芽达到3～5cm时，停止分化培养；D)、再生苗的生根培养：将步骤C)所得的不定芽作为小苗转接到生根培养基上进行生根培养，直至小苗上长出至少3条且长度≥2cm的不定根；得可出瓶种植的种苗，所述可出瓶种植的种苗为再生植株；培养条件：25±1℃，需光培养，光照强度为200～300mol m‑2·s‑1；上述步骤A)～D)均在无菌环境中进行。