用高分子化合物聚丙烯酸制备菠萝蛋白酶的方法

摘要

本发明提供了一种用高分子化合物聚丙烯酸制备菠萝蛋白酶的方法，包括如下步骤：(1)菠萝蛋白酶的提取；(2)冷凝聚；(3)游离出菠萝蛋白酶；(4)固态酶制剂制备等步骤。本发明的优点在于：(1)由于聚丙烯酸无毒性，用聚丙烯酸制备的菠萝蛋白酶无污染，其纯度高，活性好，可直接作为医疗原料应用；(2)聚丙烯酸原料来源方便，可用于工业化大规模生产；(3)本发明方法操作简单，快速、高效，分离量大。

主权项

用高分子化合物聚丙烯酸制备菠萝蛋白酶的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)菠萝蛋白酶的提取：取菠萝果皮或茎叶，洗净；加入含4～6mmol/L焦亚硫酸钠和1～5mmol/L乙二胺四乙酸二钠的水溶液，菠萝果皮或茎叶与水溶液的固、液质量比为5∶1.5～2.5，匀浆；过滤得滤液；3500～4000r/min，离心滤液，收集上清液，即得菠萝蛋白酶提取液；(2)冷凝聚向上述步骤(1)所得菠萝蛋白酶提取液中加入0.5～0.8％的聚丙烯酸后，置于4～8℃冷凝聚12～14小时；3500～4000r/min，离心，收集沉淀，即为聚丙烯酸‑菠萝蛋白酶；(3)游离出菠萝蛋白酶及聚丙烯酸回收：向步骤(2)所得聚丙烯酸‑菠萝蛋白酶中，加入可以溶解沉淀量的50～60mmol/L醋酸钙，使菠萝蛋白酶游离出来，同时生成聚丙烯酸‑钙沉淀；3500～4000r/min，离心，上清液即为菠萝蛋白酶液，沉淀为聚丙烯酸‑钙；(4)固态酶制剂制备：向步骤(3)所得菠萝蛋白酶液中加入1/15mol/L，pH6.8的磷酸氢二钠‑磷酸二氢钠缓冲液，4～8℃透析8～12小时；取出透析后的菠萝蛋白酶液，冷冻干燥，即得菠萝蛋白酶固体酶制剂。