一种制备羊胎盘素和羊胎盘水解胶原浓缩液的方法

摘要

一种用羊胎盘制备羊胎盘素和羊胎盘水解胶原浓缩液的方法，属于羊胎盘的利用技术领域。本发明以市售冻干羊胎盘为原料，先制备羊胎盘粉，后制备羊胎盘素粗提取液，再制备羊胎盘素和羊胎盘水解胶原浓缩液产品。本发明具有方法简单，操作简便，设备简单，反应条件温和，节约能源；本发明方法在制备出羊胎盘素的同时，还制得羊胎盘水解胶原浓缩液及饲料添加剂等多种产品，实现了羊胎盘的综合利用；在生产过程中充分利用物质资源，无“三废”排放，有利于环保；生产成本低，便于推广应用。本发明可广泛用于制备羊胎盘素和羊胎盘水解胶原浓缩液，采用本发明制备出的产品可广泛应用于化妆品、保健品等行业中。

主权项

一种用羊胎盘制备羊胎盘素和羊胎盘水解胶原浓缩液的方法，其特征在于所述方法的具体步骤如下：(1)制备羊胎盘粉以市售的冻干羊胎盘为原料，先将冻干羊胎盘置于带冷却夹套的粉碎机中，再向粉碎机的夹套中通入4～10℃的冷却水，在转速为1000～5000转/分的条件下进行粉碎5～15分钟，粉粹完成后，用40～80目的分样筛进行筛分，分别收集过筛的粉末和未过筛的颗粒；(2)制备羊胎盘素粗提取液第(1)步完成后，按照第(1)步收集的过40～80目分样筛粉末的质量∶质量浓度为0.05～0.5％的NaCl溶液的体积比为1g∶50～80mL的比例，将过筛粉末加入到NaCl溶液中，搅拌混合均匀后，再在4～8℃的温度下，进行搅拌提取4～5小时，提取完成后，将提取液泵入管式离心机中，在6000～10000转/分的转速下，进行离心分离，分别收集离心清液和离心沉淀；(3)制备羊胎盘素第(2)步完成后，将第(2)步收集的离心清液泵入截留分子量为2000～10000Da的超滤机中，在0.05～0.2MPa下，进行超滤分离，直至离心清液体积减少至原体积的1/3～1/6时为止，分别收集超滤滤过液和超滤截留液，将收集的超滤截留液，泵入高压均质机中，在20～60MPa下进行高压均质，收集泵出液；再将收集的泵出液，即高压均质液，与第(3)步收集的超滤滤过液合并后，泵入脱色釜中，按照活性炭的质量∶合并液的体积比为1g∶10～30mL的比例，在合并液中加入活性炭，在室温下进行搅拌脱色10～20分钟，然后将脱色液泵入真空抽滤机中，进行真空抽滤，分别收集滤过液和滤渣；然后将收集的滤过液泵入反渗透器中，进行反渗透浓缩，至反渗透截留液中可溶性固形物含量达到5～8％时为止，分别收集反渗透渗过液和反渗透截留液，对于收集的反渗透截留液，按照反渗透截留液∶质量浓度为1％的透明质酸∶甘油∶百霉杀防腐剂的体积比为1∶0.05～0.08∶0.08～0.1∶0.005～0.01的比例，在反渗透截留液中加入透明质酸、甘油及百霉杀防腐剂，搅拌混合均匀后，泵入微孔滤器中，用0.22～0.45um的微孔滤膜进行微滤，微滤完成后，分别收集微滤滤过液和微滤截留物；(4)制备羊胎盘水解胶原浓缩液第(3)步完成后，按照第(2)步收集的离心沉淀的质量∶纯净水的体积比为1g∶3～8mL的比例，在离心沉淀中加入纯净水，并泵入高速匀浆机中进行打浆后，用40～80目的分样筛进行筛分，分别收集过筛液和未过筛的渣，对于未过筛的渣，按照未过筛的渣的质量∶纯净水的 体积比为1g∶30mL的比例，用纯净水对未过筛的渣进行洗涤，分别收集洗涤液和洗涤渣，最后将过筛液与洗涤液合并，即制备出胎盘渣匀浆液；然后将胎盘渣匀浆液泵入反应釜中，搅拌升温至50～60℃，并用氢氧化钠溶液调节其pH值为8～9，再按照泵入反应釜中胎盘渣匀浆液的体积∶碱性蛋白酶的质量∶中性蛋白酶的质量∶酸性蛋白酶的质量比为1mL∶0.02～0.03g∶0.02～0.03g∶0.02～0.03g的比例，向反应釜中依次分别加入碱性蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶，并分别在50～60℃的恒温下搅拌水解40～60分钟，连续水解完成后，将水解液泵入管式离心机中，在3000～8000转/分的转速下，进行离心分离，分别收集离心清液和下层沉淀，对于收集的离心清液，泵入脱色釜中，按照活性炭的质量∶合并液的体积比为1mL∶10～30g的比例，加入活性炭，并升温至80～100℃，进行搅拌脱色10～20分钟后，将脱色液泵入抽滤机中，进行真空抽滤，分别收集滤过液和滤渣；最后将收集的滤过液泵入真空浓缩机中，在真空度为0.04～0.08MPa，温度为60～100℃的条件下，进行真空浓缩，直至浓缩液中可溶性固形物浓度达到20％～25％时为止，收集真空浓缩液，对于收集的真空浓缩液，泵入调配釜中，按照真空浓缩液∶甘油∶百霉杀防腐剂∶羧甲基纤维素钠的体积比为1∶0.08～0.1∶0.005～0.01∶0.01～0.03的比例，在调配釜中加入甘油、百霉杀防腐剂、羧甲基纤维素钠，搅拌混合均匀，就制备出短肽含量为15％～20％的羊胎盘水解胶原浓缩液。