发明名称 |
一种检测乙型肝炎病毒变异的试剂盒 |
摘要 |
本发明公开了一种检测乙型肝炎病毒变异的试剂盒,由PCR引物I、II、III、IV、杂交膜、预杂交液、杂交液、抗体、洗脱液I、II、III、IV、缓冲液I、II、III、显色液和终止液等成分组成。本发明针对靶基因的突变部位设定多个探针,利用探针与模板的特异性结合,然后通过显色进行观察结果。本发明简便实用,特异性高,灵敏度强,适于基层单位及现场快速检测。 |
申请公布号 |
CN101619365B |
申请公布日期 |
2012.06.13 |
申请号 |
CN200910047185.0 |
申请日期 |
2009.03.06 |
申请人 |
中国人民解放军第二军医大学 |
发明人 |
曹广文;刘世建;顾春英;殷建华;张宏伟 |
分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;G01N33/569(2006.01)I;C12R1/93(2006.01)N |
主分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I |
代理机构 |
上海新天专利代理有限公司 31213 |
代理人 |
王巍 |
主权项 |
1.一种检测乙型肝炎病毒变异的试剂盒,其特征在于所述试剂盒由下列成分组成:(1)PCR引物I、II、III、IV各1ml;(2)杂交膜20张;(3)预杂交液200ml;(4)杂交液200ml;(5)抗体100ul碱性磷酸酶交联的链亲和素生物素抗体;(6)洗脱液I、II、III、IV各100ml;(7)缓冲液I、II、III各200ml NaCl,Tris,牛血清白蛋白;(8)混合显色液NBT/BCIP100ml;(9)0.2mmol/L EDTA终止液20ml;所述PCR引物I由P1和P2混合组成1ml引物I,合成的浓度为20D,按照摩尔浓度的200倍稀释,合成后的引物稀释成5μM,上游引物和下游引物各取500ul,按照1∶1混合后的引物浓度为10μM,其它引物的稀释方法相同,总量均为1ml,P3和P4混合组成引物II,P5和P6混合组成引物III,P7和P8混合组成引物IV;所述人工合成引物P1,P2,P3,P4,P5,P6,P7,P8的序列分别如下:<img file="FSB00000707933600011.GIF" wi="1004" he="588" />;所述人工合成探针序列如下:<img file="FSB00000707933600021.GIF" wi="1638" he="1697" />所述杂交膜为人工合成探针固定到尼龙膜上制得。 |
地址 |
200433 上海市杨浦区翔殷路800号 |