生产分泌性三聚受体类似物和生物活性融合蛋白的方法与组合物

摘要

本发明公开生产三聚形式的分泌性可溶性受体和生物活性多肽的方法与组合物。所述方法包括将编码具有配体结合域的可溶性受体或生物活性多肽的DNA模板融合到编码胶原C-前肽的DNA序列，所述胶原C-前肽能够自组装为共价连接的三聚体。所产生的融合蛋白作为三聚可溶性受体类似物而分泌，可用于更有效地中和其天然三聚配体的生物活性。

主权项

一种产生分泌三聚融合蛋白的方法，其包含：(a)构建包含连接到编码信号肽序列的模板的转录启动子的DNA构建物，所述信号肽序列框内融合到待三聚化的非胶原蛋白多肽，所述待三聚化的多肽又框内连接到能够自身以二硫键共价稳固三聚化的胶原蛋白原C末端多肽部分，所述多肽与待三聚化的第一多肽异源(heterologous)；(b)将所述DNA构建物引入真核细胞内；(c)在生理条件下在适当的培养基中生长所述宿主细胞，使得可以分泌由所述DNA序列编码的三聚融合蛋白，所述三聚融合蛋白为三聚可溶性人胎盘碱性磷酸酶(AP)‑胶原融合蛋白、三聚可溶性人TNF‑RII‑胶原融合蛋白、三聚可溶性人CD4‑胶原融合蛋白中的一种；(d)从所述宿主细胞的培养基分离所述三聚化融合蛋白。