一种马尾松(Pinus massoniana)组织培养及组织再生植株瓶内菌根化方法

摘要

本发明公开了一种马尾松(Pinus massoniana)组织培养及再生植株瓶内菌根化方法，属于生物技术和现代林业技术领域。该方法以马尾松无菌苗顶芽为外植体，首先诱导产生大量生长健壮的丛生芽，进而诱导不定根发生，不定根诱导完成后，在无菌条件下，将具有肉眼可见不定根的植株转移至珍珠岩基质上，同时接种外生菌根真菌彩色豆马勃(Pisolithustinctorius)，于瓶内实现菌根化。菌根化改善了马尾松组培再生植株不定根根系的质量，使平均侧根数、平均根长大大提高。菌根化还使不定根的形态发生了很大变化，在不定根表面形成了由十多层菌丝紧密排列的菌套。通过本方法，马尾松丛生芽诱导率达95％，增殖率达430％，生根率达85％，移栽成活率由65％提高到85％以上。

主权项

一种马尾松组织培养及组培再生植株瓶内菌根化方法，其特征在于该方法包括以下步骤：(1)将马尾松无菌苗顶芽接种于含有6‑BA、NAA和蔗糖的基本培养基GD上，诱导丛生芽；(2)将已产生丛生芽的无菌苗顶芽转接于含有AC和蔗糖的1/2GD培养基中，促进丛生芽伸长；(3)单个切下高1.0～1.5cm的嫩芽，接种到含NAA、IBA和蔗糖的1/4GD或1/2SH培养基中诱导不定根；(4)将具有肉眼可见不定根的植株转移至无激素的基质中，同时接种事先已培养好的菌根真菌；(5)将组培再生植株移栽至河沙、珍珠岩与有机土混合基质中，喷水保湿；在步骤(1)所述诱导丛生芽的培养基中6‑BA浓度为3～4mg/L，NAA浓度为0.1～0.3mg/L，蔗糖浓度为3％；在步骤(2)所述促进丛生芽伸长的培养基中AC浓度为0.5～1.0g/L，蔗糖浓度为2％；在步骤(3)所述诱导不定根的培养基中NAA浓度为0.1～0.2mg/L，IBA浓度为0.5～1.5mg/L，蔗糖浓度为1％；在步骤(4)中当将具有肉眼可见不定根的植株转移至无激素的基质时，所用的基质为珍珠岩，其中添加含0.5％蔗糖的1/4GD或1/2SH液体培养基。