发明名称 一种绒毛膜促性腺激素的纯化方法
摘要 本发明提供一种从孕妇尿液中提取的绒毛膜促性腺激素的纯化方法。与现有技术中已有的HCG的提取纯化方法相比,本方法具有收率更高的优点,同时单位效价可以达到5000iu/mg以上。
申请公布号 CN101792481B 申请公布日期 2012.05.30
申请号 CN201010132780.7 申请日期 2010.03.12
申请人 丽珠医药集团股份有限公司;上海丽珠制药有限公司 发明人 万龙岩;陈辉;阮振兴
分类号 C07K1/36(2006.01)I;C07K1/30(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I;C07K14/59(2006.01)I 主分类号 C07K1/36(2006.01)I
代理机构 北京泛华伟业知识产权代理有限公司 11280 代理人 郭广迅;曹津燕
主权项 一种从孕妇尿液中提取的绒毛膜促性腺激素的纯化方法,其特征在于包括以下步骤:(1)用溶液A对绒毛膜促性腺激素粗品进行提取,提取液流经阴离子交换树脂柱进行吸附,再用溶液B洗脱,得到洗脱液即为中间体I;(2)中间体I经阴离子交换凝胶层析,用溶液C洗脱,向洗脱液中加入乙醇进行沉淀,干燥沉淀得中间体II;(3)将中间体II用溶液D溶解,加入溶液E和溶液F除热原,再加入乙醇进行沉淀,干燥沉淀,分装得成品;其中,所述溶液A为0.05‑0.08mol/L醋酸钠溶液,以冰醋酸调节pH至4.5‑5.5;溶液B为0.08‑0.12mol/L醋酸钠溶液,以冰醋酸调节pH至4.5‑5.5;溶液C含有0.05‑0.15mol/L醋酸钠和0.05‑0.15mol/L氯化钠,以冰醋酸调节pH至4.5‑5.5;溶液D为含有8‑10重量%乙酸铵的20‑60体积%乙醇溶液;溶液E为0.1‑0.3mol/L磷酸钠溶液;溶液F为0.2‑0.4mol/L醋酸钙溶液;其中,步骤(1)中所述阴离子交换树脂为DEAE阴离子交换树脂;步骤(2)中所述阴离子交换凝胶为CM·sephadax c‑50。
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