对有机磷农药抗性野桑蚕种群的检验方法

摘要

本发明公开了一种对有机磷农药抗性野桑蚕种群的检验方法，其特征在于：首先提取待检野桑蚕的血液，使血液与含有β-乙酸萘酯的底物溶液反应，再用固兰B盐进行显色分析，当反应颜色略带紫色时，判定该野桑蚕个体对有机磷农药有抗性。本发明用于对野外害虫的抗性进行检验，具有客观的代表性；其操作方便，检验成本低，灵敏度高，检验快速，特别适合于现场检验。

主权项

一种对有机磷农药抗性野桑蚕种群的检验方法，其特征在于，包括下列步骤：(1)材料的准备，包括，将β‑乙酸萘酯溶解在丙酮中，浓度为2‑3mg/mL，然后加入25倍体积的pH 7.0的磷酸盐缓冲液，再用蒸馏水稀释至2倍，配制成底物溶液；在桑田随机收集野桑蚕5龄幼虫至少100头，保存在3～8℃培养冰箱中备用；(2)试验：取1头上述野桑蚕5龄幼虫，用剪刀剪去幼虫的腹足，取其血液滴于准备好的滤纸上；吸有血液的滤纸浸入37℃的底物溶液中至少15秒，然后放于玻璃板上，在滤纸上放0.2‑0.3mL 0.4％的固兰B盐，1分钟后，加0.2‑0.3mL的三氯乙酸；(3)显色分析：滤纸吸收酶液的部分及四周，反应颜色略带紫色的个体为对有机磷抗性个体，反应颜色不明显的个体为敏感个体；(4)重复步骤(2)、(3)，记录抗性个体和敏感个体的数量。