一种产朊假丝酵母流加发酵制备谷胱甘肽的方法

摘要

本发明属于微生物发酵领域，具体涉及一种产朊假丝酵母流加发酵制备谷胱甘肽的方法，以产朊假丝酵母(Candida utilis)SZU 07-01为出发菌株，经斜面培养和种子培养后，发酵至少42小时；所述发酵具体包括以下步骤：将扩大培养后的种子按5％～10％的接种量接入发酵培养基，发酵温度28～32℃，搅拌转速250～300rpm，通气量0.5～1.5vvm；并且，在发酵的第10～12小时，向发酵培养基中流加补料培养基，并且，通过手动调节转速及通气量，控制溶解氧浓度大于等于35％。由于本发明采用了多项式流加发酵方式，在满足酵母细胞对营养物质需求的基础上，可以进一步提高细胞密度和GSH产量；同时明显降低发酵时间，提高生产效率。

主权项

一种产朊假丝酵母流加发酵制备谷胱甘肽的方法，在总葡萄糖浓度为150g/L的条件下采用多项式流加发酵培养，以产朊假丝酵母(Candida utilis)SZU 07‑01为出发菌株，斜面种子活化4～6小时后，接入装有50mL种子培养基的500mL三角瓶中培养18～24小时即得一级种子，之后再按10％的接种量将一级种子接入相同培养基中培养18～24小时制备二级种子，培养温度28～32℃，转速200rpm；斜面及种子培养基(g/L)：葡萄糖20，蛋白胨20，酵母膏10，pH 6.0；再进行发酵；其特征在于，所述发酵具体包括以下步骤：分批发酵：将准备好的二级种子按10％的接种量接入装有3L发酵培养基的全自动发酵罐中，培养24～30小时，发酵温度28～32℃，搅拌转速300rpm，通气量1vvm；分批发酵培养基(g/L)：葡萄糖30，硫酸铵8，磷酸二氢钾3，硫酸镁0.25，pH 5.5；多项式流加发酵：在分批发酵的第10～12小时，向发酵罐中流加补料培养基，补料培养基(g/L)：葡萄糖600，硫酸铵80，磷酸二氢钾30，硫酸镁2.5，流加速率F(mL/h)由多项式方程确定：F＝34.566‑4.994×t+1.235×t2‑0.041×t3其中，t代表时间，单位为小时；培养条件同分批培养，并通过手动调节转速及通气量，控制溶解氧浓度大于等于35％。