一种拟青霉代谢产物及其应用

摘要

本发明涉及一种拟青霉代谢产物及其应用，属于微生物药物筛选技术领域。本发明是这样实现的：生产菌株为Paecilomyces sp.1788，保藏号：CGMCC No.3422；将拟青霉(Paecilomyces sp.1788)通过查氏培养基常规液体发酵培养，将发酵液低压浓缩后，水相经反复柱层析，洗脱得到本发明的拟青霉代谢产物。本发明的拟青霉代谢产物具有毒杀松材线虫(Bursaphelenchuh xylophilus)的功能，24小时的半致死率(ED50)为299.5ppm，ED95为796.2ppm。能作为制备杀松材线虫制剂的应用。本发明与现有的杀松材线虫药相比，具有高效、低毒、易溶于水、易制备等特点。

主权项

一种拟青霉代谢产物的生产方法，其特征在于该生产方法的步骤如下：a.生产菌株为Paecilomyces sp.1788，保藏号：CGMCC No.3422；b.将1788菌株的菌丝体接种到试管PDA固体培养基斜面上，20‑30℃下培养4‑8天，获得试管种；c.将试管种接种到每瓶装50ml液体培养基的250ml三角瓶中，培养基配方为：蛋白胨10g，酵母膏10g，葡萄糖20g，自来水1000ml，pH自然；培养温度20‑30℃；摇床培养，转速为100‑250rpm；培养时间5‑15天；d.将含菌丝的发酵液低压浓缩后，用乙酸乙酯和正丁醇依次萃取，萃取后的水相部位低压浓缩形成浓缩液，将其缓慢加入2倍体积的丙酮中并不断搅拌，然后静置，形成丙酮水溶相和沉淀相，再分离两相；e.重复数次直至丙酮水溶相基本无色，收集沉淀相；沉淀相重复过聚己酰胺柱，以丙酮与水梯度洗脱，再经过C‑18硅胶柱和SephadexLH‑20凝胶柱甲醇洗脱，以TLC板为参考合并组分，活性跟踪检测所分离得到活性组分，用0.5％茚三酮乙醇溶液显色成红色。