连续柱层析法提纯苦马豆素的工艺

摘要

本发明属于天然产物化学研究领域，具体涉及天然产物提取、分离、纯化和检测方法，尤其涉及一种连续柱层析法提取苦马豆素的工艺。本发明要克服现有技术中存在的工艺复杂，成本高，得率低的不足。其解决方案是，依次包括下述步骤：(1)疯草的预处理；(2)疯草浸膏的获取；(3)粗品制备：浸膏用极性大孔吸附树脂进行粗分，TLC检测，合并含有苦马豆素的洗脱液作为粗品备用；(4)纯化苦马豆素：将上述粗品过硅胶柱层析纯化，TLC检测，GC检测，分别收集苦马豆素相对含量≥10％的部分；(5)HPLC检测获得苦马豆素纯品：将(4)中的收集部分通过HPLC检测，收集苦马豆素出峰时间段的流出液，挥干溶剂后，重结晶即得苦马豆素纯品。

主权项

一种连续柱层析法提纯苦马豆素的工艺，依次包括下述步骤：⑴疯草的预处理：将疯草处理为干燥粉末状，备用；⑵疯草浸膏的获取：将粉碎干燥后的疯草粉末5～10倍重量的极性溶剂反复冷浸提取4～6次，每次5～8天，过滤取上清液，合并，减压回收极性溶剂，得疯草浸膏，干燥保存待用；⑶粗品制备：取制得的浸膏，用2～4倍量的体积比为4～6︰1的极性溶剂‑水充分溶解，离心，过滤，弃去残渣，上清液浓缩后，用市售的D101、YWD‑03或YWD‑06极性大孔吸附树脂进行粗分，TLC检测，合并含有苦马豆素的洗脱液作为粗品备用；⑷纯化苦马豆素：将上述粗品在50～60℃水浴挥干溶剂，用适量的体积比为65～75︰5～7︰18～22︰4的氯仿－丙酮－甲醇－氨水充分溶解，离心，过滤，除去残渣，上清液浓缩后，过硅胶柱层析纯化，TLC检测，GC检测，分别收集苦马豆素相对含量≥10%的部分；其余含少量苦马豆素的部分合并，积累到一定量之后，再重复进行硅胶柱层析纯化步骤；⑸HPLC检测获得苦马豆素纯品：利用苦马豆素标样判断出其在进行HPLC检测时的出峰位置，再将（4）中的收集部分在相同色谱条件下进行HPLC检测，收集该保留时间的流出液，挥干溶剂后，重结晶即得苦马豆素纯品；其余部分合并，积累到一定量之后，再重复进行硅胶柱层析纯化步骤；所述步骤（2）或（3）中，极性溶剂是食用乙醇或甲醇。