检测突变的方法

摘要

本发明提供了用于准确有效的检测生物体突变的方法。所述用于检测突变的方法包括下述步骤：a)使用正向引物和反向引物扩增靶多核苷酸；b)通过用限制性内切酶酶切扩增的靶多核苷酸，生成两个或两个以上单链多核苷酸片段，该片段包含长度为2～32个碱基的一个或多个突变序列；以及c)检测酶切片段的分子量。

主权项

一种检测突变的方法，包括：a)使用引物对扩增靶多核苷酸以制备一扩增的靶多核苷酸，所述引物对选自：用于检测人maspin基因的第4内含子的第2741位碱基突变的SEQ IDNOS.2和3；用于检测人maspin基因的第4内含子的第3597碱基突变的SEQID NOS.7和8；用于检测乙型肝炎病毒DNA聚合酶的酪氨酸‑天门冬氨酸‑天门冬氨酸位点的碱基突变的SEQ ID NOS.12和13；用于检测丙型肝炎病毒5’非编码区碱基突变的SEQ ID NOS.20和21；用于检测丙型肝炎病毒5’非编码区碱基突变的SEQ ID NOS.25和26；以及用于检测丙型肝炎病毒5’非编码区碱基突变的SEQ ID NOS.30和31；b)将所述扩增的靶多核苷酸与限制性核酸内切酶FokI和BstF5I，或限制性核酸内切酶MmeI和AvaII接触以生成两个或更多个限制性酶切片段，所述限制性酶切片段各由两条2～32个核苷酸的单链片段组成，其中各所述单链片段都包含至少一个突变序列，所述突变序列是碱基的取代、缺失或插入；以及c)检测所述单链片段的分子量，其中，所述方法用于非疾病诊断目的。