| 摘要 |
1. Способ селективного обогащения и/или разделения N-концевых фрагментов полипептидов и/или пептидов в образце, включающий: ! (a) двойное химическое мечение белков, полипептидов и/или пептидов, включенных, по меньшей мере, в первый образец; ! (b) двойное химическое мечение белков, полипептидов и/или пептидов, включенных, по меньшей мере, во второй образец; !(c) объединение меченых белков, полипептидов и/или пептидов стадий (a) и (b); ! (d) гидролиз меченых белков, полипептидов и/или пептидов с образованием их фрагментов; ! (e) фракционирование указанных фрагментов; ! (f) осуществление реакции метилирования с указанными фрагментами; ! (g) повторное фракционирование указанных фрагментов; ! (h) сравнение фракционированных образцов, полученных на стадиях (e) и (g); и ! (i) разделение N-концевых фрагментов указанных полипептидов и/или пептидов, несущих метку, на основании результатов, полученных на стадии (g), ! где двойное химическое мечение на стадиях (a) и (b) включает изотопную и изобарную метку. ! 2. Способ по п.1, где, по меньшей мере, одна химическая метка, используемая на стадиях (a) и (b), имеет конфигурацию, дающую возможность мечения первичных аминогрупп указанных полипептидов и/или пептидов. ! 3. Способ по п.2, где первичные аминогруппы представляют собой N-концы указанных полипептидов и/или пептидов. ! 4. Способ по любому из пп.1-3, где на стадиях (a) и (b) используют, по меньшей мере, две различные изотопные метки. ! 5. Способ по п.1, где изотопные и/или изобарные метки, используемые на стадии (a) и/или (b), дополнительно включают аффинную группу. ! 6. Способ по п.1, где после мечения любые свободные аминогруппы, присутствующие в указанных белках, полипепт |
