人体尿液中沙丁胺醇、雌二醇、双酚A和己烯雌酚的共检测方法

摘要

本发明涉及生物工程技术领域，特别是涉及一种人体尿液中沙丁胺醇、雌二醇、双酚A和己烯雌酚的共检测方法。其特征在于包括以下步骤：收集人体尿液，将尿液离心后保存；向尿液中加入内标萘羟心胺，再加入甲醇和盐酸进行酸解；向剩余尿液中加入氢氧化钠溶液和乙酸钠缓冲液，然后过cleanert PCX固相萃取柱，收集洗脱液为A液，剩余液待用；取剩余尿液，过cleanert PEP固相萃取柱，收集洗脱液为B液；吹干A液，用乙腈复溶后衍生化；吹干B液，加碳酸钾溶液后用石油醚萃取两次，合并有机相，经无水硫酸钠脱水吹干，最后用正己烷复溶；取吹干A液和吹干B液用于气相色谱质谱联用测定；本发明具有简便、快捷、结果可靠、自动化程度高、便于产业化应用的特点。

主权项

一种人体尿液中沙丁胺醇、雌二醇、双酚A和己烯雌酚的共检测方法，其特征在于包括以下步骤：第一步，收集人体尿液10‑20ml将收集的尿液离心后保存；第二步，取第一步得到的尿液，加入内标萘羟心胺，再加入甲醇和盐酸进行酸解；第三步，取第二步中的剩余液，加入氢氧化钠溶液和乙酸钠缓冲液，然后过cleanert PCX固相萃取柱，固相萃取条件为：用2ml甲醇和2ml 0.1M的HCl活化预处理；以8ml/min的流速过样品；用2ml 0.1M的HCl和2ml甲醇洗柱；用2ml体积比为80∶2∶2的氯仿/异丙醇/32％氨水的混合液洗脱，收集洗脱液为A液，上固相萃取柱的直接流出液待用；第四步，取第三步中的样品上固相萃取柱的直接流出液，过cleanert PEP固相萃取柱，固相萃取条件为：用3ml MTBE、3ml甲醇和3ml纯水活化预处理；用3ml体积比为1∶1的甲醇/水的混合液洗涤；用6ml体积比为1∶9的甲醇∶MTBE的混合液洗脱，收集洗脱液为B液；第五步，吹干A液，用乙腈复溶后加MSTFA衍生化；第六步：吹干B液，加PFPA衍生化，加碳酸钾溶液后用石油醚萃取两次，合并有机相，经无水硫酸钠脱水吹干，最后用正己烷复溶；第七步：取第五步和第六步中的反应液用于气相色谱质谱联用测定。