发明名称 |
一种顶头孢霉蛋白质组的制备方法 |
摘要 |
本发明公开了一种顶头孢霉蛋白质组的制备方法,包括以下步骤:将顶头孢霉菌体用液氮研磨成粉末状后,用TCA-丙酮沉淀法提取总蛋白样品;将所得的总蛋白样品与水化溶液混合后,水化上样,采用IPG固相胶条,然后进行等电聚焦,等电聚焦完成后,将胶条平衡后转移至SDS-PAGE凝胶上,进行电泳,当溴酚蓝指示剂到达底部边缘时停止电泳,得凝胶;将所得的凝胶经染色后,用凝胶扫描仪透射扫描,将得到的图像用软件进行分析。头孢菌素C在生产头孢类抗生素中具有重要地位,可由此开展对顶头孢霉的蛋白质组学研究,为优化头孢菌素产生菌的分子育种及代谢工程打下基础,具有重要的意义。 |
申请公布号 |
CN102443047A |
申请公布日期 |
2012.05.09 |
申请号 |
CN201010503369.6 |
申请日期 |
2010.10.12 |
申请人 |
上海医药工业研究院 |
发明人 |
胡又佳;刘艳;朱春宝;朱宝泉;刘红;龚桂花 |
分类号 |
C07K1/36(2006.01)I;C07K1/30(2006.01)I;C07K1/28(2006.01)I;C07K1/26(2006.01)I |
主分类号 |
C07K1/36(2006.01)I |
代理机构 |
上海智信专利代理有限公司 31002 |
代理人 |
薛琦;朱水平 |
主权项 |
一种顶头孢霉蛋白质组的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:将顶头孢霉菌体用液氮研磨成粉末状后,用TCA‑丙酮沉淀法提取总蛋白样品;将所得的总蛋白样品与水化溶液混合后,水化上样,采用IPG固相胶条,然后进行等电聚焦,等电聚焦完成后将胶条平衡,然后转移至SDS‑PAGE凝胶上进行电泳,当溴酚蓝指示剂到达底部边缘时停止电泳,得凝胶;将所得的凝胶经染色后,用凝胶扫描仪透射扫描,将得到的图像用软件进行分析。 |
地址 |
200040 上海市北京西路1320号 |