发明名称 一种顶头孢霉蛋白质组的制备方法
摘要 本发明公开了一种顶头孢霉蛋白质组的制备方法,包括以下步骤:将顶头孢霉菌体用液氮研磨成粉末状后,用TCA-丙酮沉淀法提取总蛋白样品;将所得的总蛋白样品与水化溶液混合后,水化上样,采用IPG固相胶条,然后进行等电聚焦,等电聚焦完成后,将胶条平衡后转移至SDS-PAGE凝胶上,进行电泳,当溴酚蓝指示剂到达底部边缘时停止电泳,得凝胶;将所得的凝胶经染色后,用凝胶扫描仪透射扫描,将得到的图像用软件进行分析。头孢菌素C在生产头孢类抗生素中具有重要地位,可由此开展对顶头孢霉的蛋白质组学研究,为优化头孢菌素产生菌的分子育种及代谢工程打下基础,具有重要的意义。
申请公布号 CN102443047A 申请公布日期 2012.05.09
申请号 CN201010503369.6 申请日期 2010.10.12
申请人 上海医药工业研究院 发明人 胡又佳;刘艳;朱春宝;朱宝泉;刘红;龚桂花
分类号 C07K1/36(2006.01)I;C07K1/30(2006.01)I;C07K1/28(2006.01)I;C07K1/26(2006.01)I 主分类号 C07K1/36(2006.01)I
代理机构 上海智信专利代理有限公司 31002 代理人 薛琦;朱水平
主权项 一种顶头孢霉蛋白质组的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:将顶头孢霉菌体用液氮研磨成粉末状后,用TCA‑丙酮沉淀法提取总蛋白样品;将所得的总蛋白样品与水化溶液混合后,水化上样,采用IPG固相胶条,然后进行等电聚焦,等电聚焦完成后将胶条平衡,然后转移至SDS‑PAGE凝胶上进行电泳,当溴酚蓝指示剂到达底部边缘时停止电泳,得凝胶;将所得的凝胶经染色后,用凝胶扫描仪透射扫描,将得到的图像用软件进行分析。
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