主权项 |
一种用LC‑MS仪检测地沟油的方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤A、标准溶液的配置:(1)、乙酸铵溶液:称取乙酸铵加水溶解,摇匀配制成质量浓度为0.6~0.8mg/ml的乙酸铵溶液;(2)、DBS标准储备溶液:取DBS加乙醇稀释,摇匀配制成质量浓度为0.5~2mg/m l的DBS标准储备溶液;(3)、DBS标准系列溶液:分别取DBS标准储备液加乙醇稀释,制得质量浓度分别为4μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、500μg/ml的DBS标准系列溶液;在所构建的色谱条件下,分别精密量取10μl注入LC‑MS仪,记录色谱图,以DBS浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线;步骤B、样品处理:先取样品10.0ml,加入乙醇10~20ml,80~100℃水浴加热5~10min,涡旋混合3~5min,5000~10000r/min离心5~10min,弃去油层,旋转蒸发至干;再加甲醇‑2%乙酸的水溶液3~5ml复溶,5000~10000r/min离心5~10min,取上清液加入到已活化的固相萃取柱,接着用正己烷3~5ml淋洗,弃去淋洗液,最后用体积比为98∶2的甲醇‑乙酸铵溶液3~5ml洗脱,洗脱液用0.45μm滤膜滤过,收集滤液,得到待测样品;步骤C、LC‑MS色谱条件的构建:(1)、色谱条件:色谱柱:C18柱(2.0mm×50mm×2.2μm)流动相:甲醇‑乙酸铵混合溶液,所述甲醇和乙酸铵的体积比为75~85∶15~25流速:0.2ml/min柱温:30~40℃;(2)、质谱条件:离子化模式:电喷雾电离源负离子模式(ESI‑)雾化气流速1.5L/min检测器电压:1.68kvCDL温度:200℃加热模块温度:200℃选择监测离子:m/z=297.15、311.17、325.18、339.20;步骤D、样品测定和结果判断:在构建的条件下,精密量取待测样品10μl,注入LC‑MS仪,如检出的色谱峰保留时间与高纯度DBS一致,并且在扣除背景后的样品质谱图中,有所选择检测的离子出现,且相对丰度比也与高纯度DBS一致,则可判断样品中存在DBS,进而判断样品为地沟油。 |