采用微不定芽技术快速繁殖转基因半夏的方法

摘要

本发明是一种采用生物技术领域的微不定芽技术快速繁殖转基因半夏的方法。本发明将转基因半夏外植体经过消毒后，置于生芽培养基上，光照培养，生成叶片和叶柄；待顶芽长到4-6cm时，切下叶片和叶柄，置于微不定芽诱导培养基上，光照培养，在外植体周围长出大量微不定芽；待外植体长到3-4cm时，将外植体转移到不定芽生根培养基上，使生成不定根；将生长健壮的完整植株移栽到盛有移栽基质的花盆中，通过驯化获得生长正常的转基因半夏植株；本发明筛选出适合转基因半夏微不定芽诱导和生根的培养基，转基因半夏外植体微不定芽诱导率达到90％以上，不定芽生根率为90％，再生植株移栽存活率为90％，繁殖系数达到80％以上。

主权项

一种采用微不定芽技术快速繁殖转基因半夏的方法，其特征在于，将转基因半夏外植体经过消毒后，置于生芽培养基上，光照培养，生成叶片和叶柄；待顶芽长到4cm‑6cm时，切下叶片和叶柄，置于微不定芽诱导培养基上，光照培养，在所述叶片和叶柄周围长出大量微不定芽；待所述微不定芽长到3cm‑4cm高时，将所述微不定芽转移到不定芽生根培养基上，使生成不定根；将生长健壮的完整植株再移栽到盛有移栽基质的盆中，通过驯化获得生长正常的转基因半夏植株；所述外植体为含有顶芽的地下块茎；所述生芽培养基为在MS培养基中添加1.0mg/L 6‑苄基腺嘌呤、1.0mg/L萘乙酸、30g/L蔗糖和8.5g/L琼脂粉；所述微不定芽诱导培养基为在MS培养基中添加2.0mg/L 6‑苄基腺嘌呤、30g/L蔗糖和8.5g/L琼脂粉、若从叶片诱导微不定芽要添加0.1mg/L萘乙酸，若从叶柄诱导微不定芽要添加0.25mg/L萘乙酸；所述不定芽生根培养基为在1/2MS培养基中添加激动素1.0mg/L、萘乙酸2.0mg/L、30g/L蔗糖和8.5g/L琼脂粉。