米邦塔仙人掌多糖在防治慢性神经退行性疾病中的应用

摘要

本发明揭示了米邦塔仙人掌多糖可改善大鼠神经行为障碍，减少脑梗死体积和皮层及海马神经元丢失，可减少细胞内ROS的产生，具有很好的神经保护作用，可作为预防和治疗中枢神经系统慢性神经退行性疾病的药物，用于预防和治疗中枢神经系统慢性神经退行性疾病。本发明还提供了优化的米帮塔仙人掌多糖提取工艺，该提取工艺具有方便简捷、经济适用，得糖率较高和适合大批量提取等特点。

主权项

一种制备米帮塔仙人掌多糖的方法，包括以下步骤：ａ．米帮塔仙人掌粗多糖的制备：将新鲜购置的米邦塔仙人掌茎清水洗净去皮后切成碎片，干燥，取干燥米邦塔仙人掌茎碎片投入双蒸水中，米邦塔仙人掌茎碎片与双蒸水的重量／体积比为0.1：1，于95℃ 搅拌3h过滤，去滤液，在残渣中再次加入2倍的双蒸水95℃ 搅拌2h，再次去滤液，将2次提取的滤液充分搅拌后抽滤，然后将抽滤后的滤液放入旋转蒸发仪中，旋转蒸发至原体积的10%，再加入适量的氯仿萃取4‑5次，然后将上层液体移至另一容器中，按体积比1：4加入无水乙醇至终浓度为80％，4℃ 过夜，常温抽滤，留沉淀物，依次用无水乙醇，丙酮，乙醚分别将沉淀清洗3次，去杂质后进行真空干燥得米邦塔仙人掌粗糖粉末；ｂ．米邦塔仙人掌粗糖分离纯化：用纤维素DEAE‑52分离柱进行分离纯化：首先用如下方法将上柱预处理：（1）将干粉的纤维素浸泡在蒸馏水中，约3小时左右，去除杂质，抽干；（2）用0.5mol/L的HCl溶液浸泡2小时，用去离子水洗净至PH中性，并抽干；（3）将抽干的纤维素再浸泡在0.5mol/L的NaOH溶液中2小时，用去离子水洗至中性，抽干，将粗糖粉末与45℃双蒸水按重量与体积之比为1：4的比例溶解，将此溶解液分别用双蒸水及0.5M的NaOH溶液缓冲液，用上述处理后的分离柱进行洗脱，流速3ml/5min，然后将洗脱液用苯酚‑硫酸法检测糖的出现，最后收集含糖洗脱液放入旋转蒸发仪中蒸发，转速为50‑80/3min，温度60℃，蒸发至稠状液体，进行真空干燥得纯化米邦塔仙人掌多糖粉末。