检测重组小鼠碱性成纤维细胞生长因子的免疫胶乳微球及其制备方法和应用

摘要

本发明涉及一种检测重组小鼠碱性成纤维细胞生长因子的免疫胶乳微球及其制备方法和应用。免疫胶乳微球由抗mbFGF蛋白多克隆抗体包被，微球颗粒50nm；制备方法是，根据原核细胞表达的优先密码子重新修饰并构建全长mbFGF基因表达序列，将基因序列通过限制酶切割插入谷胱甘肽-S-转移酶基因融合表达载体中并进行细菌表达，利用亲合层析柱纯化和凝血酶在线切割获得mbFGF蛋白，再将佐剂溶合抗原后免疫家兔，经分离纯化得到抗mbFGF多克隆抗体，将抗体通过化学偶联法偶联活化后的微球，得到检测mbFGF蛋白的免疫胶乳微球。应用是，通过酶联免疫吸附测定法，检测mbFGF蛋白样品，最低检测限为mbFGF蛋白60pg/ml，相关系数R2＝0.96；本发明检测灵敏度高、操作简单、重复性强。

主权项

检测重组小鼠碱性成纤维细胞生长因子的免疫胶乳微球，其特征在于是用单分散羧基化聚苯乙烯微球为基质材料，用羧基‑氨基化学偶联方法偶联抗mbFGF多克隆抗体获得的免疫胶乳微球，是由抗mbFGF蛋白多克隆抗体包被的微球，微球颗粒大小50nm。