棉籽壳栽培料常压灭菌效果指示菌的获得及利用方法

摘要

本发明公开了一种棉籽壳栽培料常压灭菌效果指示菌的获得及利用方法。属于食用菌生产的技术领域。其用于解决对食用菌栽培料的常压灭菌效果监测的生物监测手段问题。棉籽壳栽培料常压灭菌效果指示菌的获得及利用方法是将棉籽壳栽培料中的杂菌分散到处于封闭体系的细菌培养基中，按照常压灭菌程序进行不同时长的灭菌处理，较低常温下恢复培养，选择杂菌全部杀死前最后残留的菌，再经过棉籽壳栽培料上生长能力检验和常压灭菌效果指示能力检验后所获得的菌即为指示菌。这种棉籽壳栽培料常压灭菌效果指示菌的获得及利用方法可广泛地应用于食用菌的生产。

主权项

一种获得棉籽壳栽培料常压灭菌效果指示菌的方法，其特征在于，该方法包括依次进行下列步骤：(1)配制杂菌分散细菌培养基：其配方为棉籽壳栽培料1～50％、蛋白胨1％、酵母浸粉0.5％、氯化钠0.5％、磷酸氢二钾0.2％、琼脂粉1.5～2％，制作时先用部分水冷浸提栽培料中杂菌，然后将滤液与预溶的其它组分混合煮沸，随即分装成试管，试管封口；(2)进行不同时长的常压蒸汽灭菌处理：用常压蒸汽灭菌法处理(1)中的杂菌分散细菌培养基，处理时间按等差时长排列，时长的最大取值长于全部杀死杂菌所需的时间；(3)在较低常温下恢复培养：用20～24℃温度培养上述(2)中经常压蒸汽灭菌法处理的杂菌分散细菌培养基；(4)拣出最抗常压灭菌条件的残留菌：杂菌分散细菌培养基经上述(3)培养后，在达到完全杀菌状态前培养基中最后出现的单孢菌落就是最抗常压灭菌条件的残留菌，将该菌转接到细菌培养基上留存；(5)检验残留菌在棉籽壳栽培料上的生长能力：检验用培养基配方为含有0～5％麸皮的棉籽壳栽培料5～50％、琼脂粉1.5～2％，制作时取棉籽壳栽培料煮汁制成试管斜面，接种(4)中拣出的残留菌后20～24℃培养，若在24～36小时在试管斜面培养基上能形成明显菌落，表明该残留菌具有在棉籽壳栽培料上生长的能力，是与栽培菌类生长所需营养一致的菌类，然后将该残留菌经固体发酵制成残留菌麸皮菌剂，进入检验其是否具有指示常压灭菌效果能力的步骤；(6)检验残留菌是否具有指示常压灭菌效果的能力：将等重量的棉籽壳栽培料和在(5)中所制备的残留菌麸皮菌剂分别作为验证用材料；根据验证材料拌加水情况，分设干料、湿料、水浸料三种料处理状态，分装在无菌试管内；将上述装有棉籽壳栽培料和装有残留菌麸皮菌剂的无菌试管同时进行不同时长的常压灭菌处理；含有干料和湿料的试管灭菌后，无菌 条件下灌注常规细菌培养基后摆放成斜面，含有水浸料的试管灭菌后直接摆放成斜面；然后在20～24℃下培养不同时长；比较同一处理状态下装有棉籽壳栽培料和装有残留菌麸皮菌剂的试管中细菌恢复生长的情况，判定残留菌对常压灭菌效果的指示能力：若装有残留菌麸皮菌剂的试管中没有残留菌菌落出现，同时，在经同一常压灭菌时间处理的装有棉籽壳栽培料的试管中已经且均没有细菌菌落产生，则表明该残留菌具有指示常压灭菌效果的能力，即是所要获得的棉籽壳栽培料常压灭菌效果指示菌。