发明名称 |
一种枯草芽孢杆菌脂肪酶及制备方法和应用 |
摘要 |
本发明公开了一种枯草芽孢杆菌脂肪酶及制备方法和应用,一种枯草芽孢杆菌脂肪酶,大肠杆菌(Escherichia coli)BL21/pET28a-Lip A f12-C2(R33W/L140F),CCTCC NO:M2010057。这种高活力脂肪酶突变体的编码基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,其编码的蛋白具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列,其步骤是:第一是通过PCR扩增出枯草芽孢杆菌脂肪酶Lip A结构基因;第二是设计二对诱变引物,通过重叠PCR法将两个突变位点依次引入脂肪酶Lip A基因;第三获得高活力脂肪酶产生菌BL21(DE3)/Lip A(R33W/L140F);第四是在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达目的蛋白;第五是纯化蛋白。一种枯草芽孢杆菌脂肪酶在皮革加工中的应用。本发明方法易行,成本低廉,高酶活脂肪酶突变株蛋白在食品、化工和医药等行业具有重要应用价值。 |
申请公布号 |
CN101838634B |
申请公布日期 |
2012.04.25 |
申请号 |
CN201010187107.3 |
申请日期 |
2010.05.25 |
申请人 |
中国科学院武汉病毒研究所 |
发明人 |
张先恩;周亚凤;王晓英;张治平;王殿冰;危宏平;崔宗强 |
分类号 |
C12N9/20(2006.01)I;C12N15/57(2006.01)I;C14C5/00(2006.01)I |
主分类号 |
C12N9/20(2006.01)I |
代理机构 |
武汉宇晨专利事务所 42001 |
代理人 |
王敏锋 |
主权项 |
一种枯草芽孢杆菌脂肪酶,其特征在于:该酶在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21/pET28a‑Lip A f12‑C2(R33W/L140F)中表达,该大肠杆菌保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为:CCTCC NO:M2010057,其编码基因为SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。 |
地址 |
430071 湖北省武汉市武昌小洪山 |