反相高效液相色谱检测纺织品中蓝色素的方法

摘要

本发明公开了一种反相高效液相色谱检测纺织品中蓝色素的方法，其包括以下步骤：(1)制备待测样品溶液；(2)制备标准溶液；(3)取标准溶液注入高效液相色谱仪，进行反相高效液相色谱法测定，并用液质联用仪确定蓝色素的出峰位置，记录出峰面积，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，制作标准曲线方程；(4)按步骤(3)方法测定待测样品溶液中的蓝色素及其峰面积，使用所得的标准曲线计算得到待测样品中的蓝色素含量。该方法能准确、可靠、灵敏地测定出纺织品中的蓝色素及其含量。

主权项

1.一种反相高效液相色谱检测纺织品中蓝色素的方法，其特征是，具有以下步骤：1实验仪器与试剂1.1实验仪器：日本岛津LC-10AT高效液相色谱仪，Kromsil ODS-1C18，5μm，250mm×4.6mm色谱柱；SPD-10A紫外检测仪，SCL-10A记录仪，KQ-500DE型数控超声波清洗器，电热鼓风干燥箱，FINNIGAN LCQ DECA XP MAX液质联用仪；1.2药品与试剂：蓝色素标准样品：纯度为93％的C₃₉H₂₃ClCrN₇O₁₂S·2Na标准样品；2样品制备2.1提取样品制备：将单一的染色纺织样品剪成3.5cm×3.5cm的小块状，称量重为0.5562g，将试样置于50mL比色管内，加入15mL甲醇∶水＝80∶20的混合溶液，置于频率为450W超声波浴中，在70±2℃下萃取30min，萃取液于室温冷却，用孔径为0.45μm的聚四氟乙烯膜过滤器过滤，萃取物倒入1mL样品瓶中，旋紧特氟纶盖，保存备用；2.2标准样品制备：使用电子天平称量蓝色素标准样品5.4mg，用超纯水定容到10ml，得到浓度为0.502mg/ml的标准溶液；分别取标准溶液4ml、3ml、2ml到10ml容量瓶中定容，分别得到浓度为0.201mg/ml，0.151mg/ml，0.100mg/ml的溶液；分别取以上浓度的溶液4ml到10ml容量瓶中定容，得到浓度分别为0.080mg/ml，0.060mg/ml，0.040mg/ml的溶液；分别取浓度为0.201mg/ml和0.100mg/ml溶液1ml到10ml容量瓶中定容，得到浓度为0.020mg/ml和0.010mg/ml的溶液；各取浓度为0.080mg/ml，0.060mg/ml和0.040mg/ml溶液1ml置于10ml容量瓶中定容，得到浓度分别为0.008mg/ml，0.006mg/ml和0.004mg/ml的溶液；2.3流动相配备：磷酸二氢钾与磷酸钾混合溶液：称取磷酸二氢钾2.60克和磷酸钾3.53克，用800毫升纯水溶解，用10％的磷酸溶液调pH值到7.4，最后定容到1000毫升；3测定方法3.1色谱条件：Kromsil ODS-1C18，5μm，250mm×4.6mm色谱柱；柱温：室温；检测波长：254nm；流动相A：乙腈；流动相B：pH＝7.4的磷酸二氢钾与磷酸钾混合溶液；梯度洗脱：开始使用A相∶B相＝20％∶80％，35min后使用A相∶B相＝80％∶20％；流速1.2mL/分钟；自动进样，进样体积20μL；3.2标准曲线：分别量取2.2中制备的0.040mg/ml，0.020mg/ml，0.010mg/ml，0.008mg/ml，0.006mg/ml和0.004mg/ml标准溶液各20μl注入液相色谱仪，按上述方法配置标准品溶液用反相高效液相色谱法测定，在254nm波长处测定出峰面积，记录峰面积，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线图；得到回归方程为：Y＝aX+b，其中a＝3.792316e-008，b＝2.967865e-003，R＝0.9995674；3.3待测样品中蓝色素含量的测定：取2.1制备的待测样品溶液，以3.1的色谱条件进行高效液相色谱测定，峰面积为410406，采用上述标准曲线，计算出所得样品溶液中蓝色素的浓度为0.01824mg/ml。