发明名称 一种猪TLR4基因C1027A碱基突变的检测方法
摘要 本发明涉及一种猪TLR4基因C1027A碱基突变的检测方法,属基因工程技术领域。根据GenBank数据库猪TLR4基因序列设计特异引物,对待检测猪模板cDNA进行PCR扩增;分离、纯化扩增产物,获得特异核酸;对分离纯化的扩增产物进行序列测定,比对分析后确定扩增序列是否存在C1027A单核苷酸突变。本发明可用于猪TLR4基因单核苷酸碱基突变的检测,对判定机体免疫模式识别改变有很大帮助,为猪疫病防控及抗病育种提供依据,同时,为猪抗病育种研究提供基因工程技术帮助。
申请公布号 CN102417928A 申请公布日期 2012.04.18
申请号 CN201110306856.8 申请日期 2011.10.10
申请人 江苏省农业科学院 发明人 方晓敏;刘筱;任守文;孟;李碧侠;王学敏
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 代理人 张素卿
主权项 一种猪TLR4基因C1027A碱基突变的检测方法,其特征在于如下步骤:步骤一,据GenBank数据库猪TLR4基因序列设计特异引物:正义引物5′‑AATGATTTCAGGTGGCAACA‑3′反义引物5′‑AATGCTTCAGTTTGGTTGTCC‑3′应用上述引物对待检测猪模板cDNA进行PCR扩增;步骤二,对特异性扩增产物进行分离、纯化,获得特异核酸;步骤三,对分离纯化的扩增产物进行序列测定、比对分析,得出待检猪TLR4基因是否存在C1027A单核苷酸碱基突变。
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