一种利用具有茎环样结构引物通过PCR制备单链DNA的方法

摘要

本发明属于生物技术领域，涉及一种利用茎环样结构的引物经PCR制备不同长度的正、负链产物，切胶回收制备单链DNA的方法。通过针对不同的DNA模板设计的下游茎环结构引物，改进PCR条件，证实PCR产物均为预期的长、短两条链，可以很容易的通过变性胶分离、纯化。本发明在涉及单链DNA制备的生物医学研究领域包括SELEX技术方面具有广泛的应用前景。

主权项

一种具有茎环结构的引物通过PCR制备单链DNA的方法，以单链DNA为模板，其特征在于，首先设计带有茎环结构的下游引物和不带茎环结构的上游引物，然后PCR扩增，扩增产物经过变性PAGE凝胶电泳，切胶回收目的单链DNA；所述带有茎环结构的下游引物由3’端与单链DNA模板互补的20个碱基和5’端富含GC碱基的一段反向重复序列组成；所述PCR的延伸温度为55‑65℃。