银杏活性成分萃取分离方法及萃取的活性物质在治疗心脑血管疾病药物中的应用

摘要

本发明公开了一种银杏活性成分萃取分离方法及萃取的活性物质在治疗心脑血管疾病药物中的应用。包括如下步骤：1)银杏干叶磨粉，提取银杏叶活性成分黄酮类和萜内酯类化合物；2)去除银杏酚酸；3)分离银杏黄酮与内酯；4)高效液相色谱法纯化内酯。利用提取的高纯度银杏内酯药物分别在器官水平、大体水平和细胞水平其对成年大鼠和老年大鼠的心功能试验，首次证明白果内酯对SD成年大鼠及SD老年大鼠皆有心脏保护作用。其优点：利用高效液相色谱法制备出纯度大于98％的4种内酯。成功的把银杏叶提取物中银杏酸含量控制在1ppm以内，实现了黄酮与内酯的分离，分离后银杏黄酮的含量达到55％以上，银杏内酯含量达到25％以上，达到国际标准。

主权项

一种银杏活性成分的萃取分离方法，以干银杏叶为原料制取，包括以下工艺步骤：1)银杏叶活性成分黄酮类和萜内酯类化合物的提取：银杏干叶磨粉，用70％乙醇以7倍量微沸提取两次，每次提取2小时，减压回收乙醇，水沉，过DA101大孔树脂柱，水洗，40％乙醇溶液以1BV/h的速度洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，干燥粉碎即得银杏叶提取物；2)去除银杏酚酸：采用溶剂法除酸，所述溶剂法除酸是：浓缩步骤1)所得洗脱液，调节pH值为5，以石油醚为萃取剂萃取5次，取水相，加一半水相体积的95％乙醇减压蒸馏，即得低酸银杏叶提取物；3)银杏黄酮与内酯粗分离：采用溶剂法分离；所述溶剂法分离黄酮与内酯是：取银杏叶提取物，用乙醇溶液充分溶解，缓慢加入有机溶剂正丁醇，过滤，取滤液，用3％氨水溶液洗涤，浓缩回收有机相，酸化，减压干燥得内酯；减压蒸发弱碱洗涤液，盐酸酸化，结晶，减压干燥结晶，干燥结晶，得黄酮；4)纯化内酯，即银杏内酯的族分离：利用高效液相色谱法纯化内酯：流动相选择体积比为55∶40∶5的乙酸乙酯、石油醚和甲醇的混合溶剂，流速为26ml/min，上样量为120mg。