一种豆渣和菌糠混合发酵制备凝乳酶的方法

摘要

本发明提供了一种豆渣和菌糠混合发酵制备凝乳酶的方法，该方法在湿豆渣中加入菌糠，然后接种微小毛霉菌种进行固体发酵，从发酵产物中提取凝乳酶。本发明巧妙利用了豆渣和菌糠的各自特点，将晒干的食用菌菌糠和湿豆渣混合来调节固体发酵培养基的水分和干料比例，这样既可以防止因湿豆渣水分太高而结团，省去干燥豆渣的环节，又保证了发酵所得酶活力不因为食用菌菌糠的掺入而降低。总之，将湿豆渣和干食用菌菌糠混合，替代麦麸进行凝乳酶固体发酵，可以变废为宝、降低凝乳酶的生产成本，技术简便易行，省时经济、酶活力较高。

主权项

一种豆渣和菌糠混合发酵制备凝乳酶的方法，其特征在于：在湿豆渣中加入菌糠，然后接种微小毛霉菌种进行固体发酵，从发酵产物中提取凝乳酶；所述方法具体包括以下步骤：（1）豆渣机械脱水：将含水量为80～85%的湿豆渣通过机械压榨脱水，使其含水量降至60%～70%；（2）配制培养料：按脱水后的湿豆渣：菌糠=3～4:1的质量比例将二者搅拌混合，使固体发酵培养基水分含量的质量百分比为50～65%；（3）装料灭菌：将拌混好的培养料装入三角瓶或固体发酵罐中，控制装料量，使料层厚度为0.2～3cm，瓶口塞入棉塞或封闭发酵罐进料口，121℃灭菌30分钟；（4）接种培养：冷却后按常规方法在培养料中接入体积比5%稀释后的微小毛霉孢子悬液，在25～35℃和70%～90%相对湿度环境下培养72～96h；所述稀释后的微小毛霉孢子悬液是将微小毛霉母种用无菌水分散，然后用4层纱布过滤，再用无菌水将滤液中的孢子悬液浓度稀释到106～107个/mL；（5）提取凝乳酶：发酵结束，将培养料从三角瓶或固体发酵罐中取出，加入10～20倍重量的4℃水，0～4℃环境下放置4～12小时；过滤除去不溶物，2000～4000rpm离心2～10分钟，收集上清液，获得凝乳酶粗提取液。