一种造血嵌合体实时定量PCR检测中嵌合体的合成方法

摘要

本发明提出一种利用荧光染料SYBR green的来检测造血嵌合体的PCR实时定量检测中的嵌合体人工合成方法，所述PCR检测方法包括步骤：收集标本；选择多态性遗传标记设计引物和探子(probe)；实时定量PCR检测造血嵌合体；人工合成12个不同稀释浓度的造血嵌合体；以及进行统计学分析。其中，所述人工合成嵌合体的方法为：利用供体DNA来稀释受体DNA或受体DNA来稀释供体DNA进行人工合成12个不同稀释浓度的造血嵌合体。本发明中介绍了12个可以用于Q-PCR(实时荧光定量)来检测造血嵌合体的特异性多态性遗传标记。另外为了弥补荧光染料SYBR green纳入双链DNA是非特异性的，同时运行熔解曲线来验证PCR产物的特异性。本发明的实时定量PCR方法所需费用便宜，保质期长，且灵敏度，为一种快捷简便而可靠的造血嵌合体的检测方法。

主权项

一种利用荧光染料SYBR green来进行造血嵌合体的实时定量PCR检测中嵌合体的合成方法，所述PCR检测方法包括以下步骤：S1.收集标本；S2.选择多态性遗传标记设计引物和探子(probe)；S3.实时定量PCR检测造血嵌合体；S4.人工合成不同稀释浓度的造血嵌合体；以及S5.统计学分析；其特征在于，所述步骤S4中人工合成嵌合体的方法为：利用供体DNA来稀释受体DNA或受体DNA来稀释供体DNA进行人工合成12个不同稀释浓度的造血嵌合体。