一种温敏型亲属螯合亲和沉淀剂的制备方法

摘要

本发明涉及一种温敏型亲属螯合亲和沉淀剂的制备方法，包括：(1)将N-乙烯基己内酰胺与甲基丙烯酸溶解在去离子水中，得混合液，然后将所述的混合液置于反应容器中，真空脱气，再加入过硫酸铵水溶液，调节体系pH值至7.0，通氮气鼓泡后密封后，反应结束后，收集反应生成的沉淀，得到温敏聚合物PNVCL-co-MAA聚合物；(2)配制PNVCL-co-MAA的Tris-HCl缓冲液溶液，然后加入硫酸铜溶液，振荡反应，收集反应生成的沉淀，即得。本发明的制备方法简单，所使用的聚合物可回收利用，有效降低蛋白质分离纯化成本，适合规模化生产；本发明所制备的温敏型亲属螯合亲和沉淀剂，操作简单，反应时间短，蛋白吸附效果好。

主权项

一种温敏型亲属螯合亲和沉淀剂的制备方法，包括：(1)将0.25～2.0g N‑乙烯基己内酰胺与25～300μl甲基丙烯酸溶解在去离子水中，得混合液，然后将所述的混合液置于反应容器中，真空脱气，再加入0.1～0.60ml含有0.01～0.06g过硫酸铵的过硫酸铵水溶液，并调节体系pH值至7.0，通氮气鼓泡后密封后，在50～70℃反应1～3h；反应结束后加入氯化钠溶液沉淀，收集反应生成的沉淀，得到温敏聚合物PNVCL‑co‑MAA聚合物；(2)用Tris‑HCl缓冲液将上述温敏聚合物PNVCL‑co‑MAA配制成浓度为0.05～0.10g/ml的PNVCL‑co‑MAA的Tris‑HCl缓冲液溶液，然后加入浓度为0.1～0.6mol/L硫酸铜溶液，在室温下振荡反应0.5～2h，收集反应生成的沉淀，得到亲和温敏聚合物PNVCL‑co‑MAA‑Cu，即为该温敏型亲属螯合亲和沉淀剂。