一种利用PCR-RFLP技术鉴别西花蓟马品系的方法

摘要

本发明涉及一种利用PCR-RFLP技术鉴别西花蓟马品系的方法，步骤如下：(1)提取西花蓟马基因组DNA；(2)以西花蓟马基因组DNA为模板对其线粒体COI基因进行PCR扩增；(3)对步骤(2)制得的PCR产物用限制性内切酶EarI酶切，得酶切产物；(4)对步骤(3)制得的酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。本发明所述的限制性内切酶为常用的限制性内切酶，为筛选两种类型西花蓟马提供了简便稳定的酶切标记，同时探索建立了两种类型西花蓟马的鉴别技术，为今后的两种类型西花蓟马的种群动态鉴定、生物学以及入侵机制的研究奠定了基础。

主权项

一种利用PCR‑RFLP技术鉴别西花蓟马品系的方法，其特征在于，步骤如下：(1)提取西花蓟马基因组DNA；(2)以西花蓟马基因组DNA为模板对其线粒体COI基因进行PCR扩增；PCR体系中，引物序列如下：正义引物：5’GGATCACCTGATATAGCATTCCC3’；SEQ ID NO.1反义引物：5’ACTGTAAATATATGATGAGCTCA3’；SEQ ID NO.2(3)对步骤(2)制得的PCR产物用限制性内切酶EarI酶切，得酶切产物；(4)对步骤(3)制得的酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳分析，当PCR产物电泳图谱显示被测样品有两条不同长度的条带时，则该被检测样品为L型西花蓟马；当PCR产物电泳图谱显示被测样品有一条条带时，则为G型西花蓟马。