建鲤促性腺激素释放激素基因六聚体原核表达载体及其构建方法和应用

摘要

本发明公开了一种高效表达多聚体促性腺激素释放激素的原核表达载体pMAL-GnRH。本发明采用RT-PCR方法从建鲤丘脑中扩增出长约400bp的目的序列GnRH基因，克隆至T载体中，经酶切鉴定和序列测定分析确认序列的正确性后通过人工合成GnRH串联六聚体并与GAP蛋白偶联后将此片段克隆到表达载体pMAL-c2x中构建重组表达质粒pMAL-GnRH；表达产物具有免疫原性，可以刺激机体产生免疫应答。

主权项

建鲤促性腺激素释放激素基因六聚体原核表达载体，其特征在于所述的原核表达载体由表达载体pMAL‑c2x构建而得，该载体含有T7启动子和终止子、细菌核糖体结合位点PBS、6个串联多聚体GnRH基因序列与一个GAP基因序列、及一个麦芽糖结合蛋白标签序列。