霍乱弧菌的链置换扩增恒温扩增(SDA)快速检测试剂盒及其检测方法

摘要

本发明涉及一种霍乱弧菌恒温扩增快速检测试剂盒及其检测方法。该试剂盒内有模板预处理反应液、链置换扩增反应液Ⅰ、Bst DNA Polymerase，BsoBI。方法包括细菌DNA的提取、模板预处理、SDA链置换恒温扩增、核酸检测。其优点是快速、特异性强、灵敏度高而且成本低。

主权项

一种霍乱弧菌的恒温扩增快速检测试剂盒，其特征在于包括：(1)模板预处理反应液：1×NEB buffer 2，1.0μM上游内引物S1、1.0μM下游内引物S2、3％(V/V)二甲基亚砜、和ddH2O；所述1×NEB buffer 2为：5mM NaCl、1mM Tris‑HCl、1mM MgCl2、0.1mM二硫苏糖醇、和ddH2O，pH 7.9；所述引物S1、S2分别如SEQ ID NO：1和2所示；(2)链置换扩增反应液I：3％(V/V)二甲基亚砜，0.1mg/mL牛血清白蛋白，浓度分别为0.2mM的dATP、dGTP和dTTP，1.0mM dCTPαS，1×NEB buffer 2，和ddH2O；(3)Bst DNA聚合酶；(4)限制性内切酶BsoBI。