主权项 |
一种利用高速逆流色谱分离中药蝼蛄药效学物质的方法,其特征在于:包括材料选择、破碎、粗提、浓缩、逆流色谱分离、收集和干燥,具体步骤包括:(1)蝼蛄研碎;(2)采用体积分数是70%的乙醇溶液, 蝼蛄与70%乙醇溶液的质量比为1∶3,80℃回流提取3次,合并提取液,在真空旋转浓缩仪中,温度为60℃,压力为0.8Pa下真空旋转浓缩至无醇浸膏;(3)所述步骤(2)得到的无醇浸膏加石油醚萃取3次,用量按照浸膏: 石油醚体积比=1:2;(4)步骤(3)石油醚萃取后浸膏加醋酸乙酯萃取3次,收集醋酸乙酯萃取液;用量按照预萃取浸膏: 醋酸乙酯体积比=1:2;(5)醋酸乙酯萃取液置真空旋转浓缩仪中,温度为60℃,压力为0.8Pa下真空旋转浓缩至无醋酸乙酯浸膏;(6)步骤(5)中得到的浸膏采用高速逆流色谱分离,溶剂系统为正己烷、乙醇和水的混合溶液,该混合溶液中:正己烷:乙醇:水的体积比=6:5:1;分离柱体积230ml;流动相为上相,转速1000r/min,流速1.5mL/min;样品量400mg,固定相保留48%,检测波长245nm;(7)出样时间起,30‑35min 收集分离样品;(8)收集样品,在真空旋转浓缩仪中,温度为60℃,压力为0.8Pa下真空旋转浓缩至无溶剂,即得到蝼蛄药效物质。 |