高速逆流色谱法用于忍冬中分离制备出咖啡鞣酸的方法

摘要

一种高速逆流色谱法用于忍冬中分离制备出咖啡鞣酸的方法，该方法包括制备忍冬水取液、制备忍冬醇沉提取液、萃取制备咖啡鞣酸粗提液、制备固定相和流动相的溶剂体系、高速逆流色谱法分离纯化过程五个工艺步骤。从忍冬中提取咖啡鞣酸粗提液，在确定分离咖啡鞣酸的最佳溶剂体系的基础上，通过控制高速逆流色谱仪的分离参数如主机转速、流动相流速和恒温循环器的温度等，最终一次性制备出纯度达95%以上的咖啡鞣酸。本发明的方法具有操作简便，过程温和，分离效果好，纯度高，安全可靠之特点。

主权项

一种高速逆流色谱法用于忍冬中分离制备出咖啡鞣酸的方法，该方法包括制备忍冬水取液、制备忍冬醇沉提取液、萃取制备咖啡鞣酸粗提液、制备固定相和流动相的溶剂体系、高速逆流色谱法分离纯化过程五个工艺步骤，其特征是：所述五个工艺步骤分述如下：①制备忍冬水取液将忍冬干燥粉碎并过40目筛后装于提取罐中并用去离子水进行浸提，忍冬与所述去离子水的重量比为1:8~10，所述去离子水的温度控制在60~90℃，所述浸提的时间控制在1~2h，将所述去离子水+忍冬形成的浸提液趁热过滤并冷却，分别制备出忍冬水取液和忍冬残留液；②制备忍冬醇沉提取液将①中制备出的所述忍冬水取液装入第一反应皿中，再向第一反应皿加入无水乙醇直至反应皿中乙醇浓度达到体积百分比60~80%时为止，放置过夜后对所述忍冬水+乙醇进行过滤得到过滤液，再对所述过滤液进行减压回收出乙醇并制备出忍冬醇沉提取液；③萃取制备咖啡鞣酸粗提液将②中制备出的所述忍冬醇沉提取液装入第二反应皿中，再向第二反应皿中加入乙酸乙酯进行萃取，所加乙酸乙酯与忍冬醇沉提取液的重量比为2:1，然后用质量百分比浓度为37.5%的盐酸调节第二反应皿中的pH值直至达到pH=1~3为止，所述萃取时间控制在1~2h，最后收集出乙酸乙酯层并制备出咖啡鞣酸粗提液；④制备固定相和流动相的溶剂体系按体积比将乙酸乙酯:乙醇:水=1~5:1~2:2~5放在第三反应皿中进行混合组成溶剂体系，待静置后第三反应皿中所述溶剂体系自然分为上相和下相，所述上相简称为固定相，所述下相简称为流动相，将所述固定相置于第四反应皿中，将所述流动相置于第五反应皿中；⑤高速逆流色谱法分离纯化过程在第四反应皿中接入第一泵，在第五反应皿中接入第二泵，设定第一泵和第二泵的流速同为10ml/min，同时开启第一泵和第二泵汇入高速逆流色谱仪的螺旋管；当所述溶剂体系从高速逆流色谱仪的管路出口流出时关闭第一泵，将第二泵的流速调节到1~3ml/min，然后同时启动高速逆流色谱仪的主电机，主电 机转速控制在700~1000r/min，高速逆流色谱仪的恒温循环器温度控制在20~50℃，待所述管路出口处只有所述流动相流出时其管路内溶剂体系达到动态平衡；最后通过高速逆流色谱仪的进样阀注入10~30ml所述咖啡鞣酸粗提液，设定高速逆流色谱仪的检测波长为327nm，最后根据高速逆流色谱仪显示的检测图谱收集咖啡鞣酸。