发明名称 |
啤酒花潜隐类病毒的实时荧光RT-PCR检测试剂及检测方法 |
摘要 |
本发明公开了啤酒花潜隐类病毒的实时荧光RT-PCR检测试剂及检测方法,包含一对特异性引物和一条特异性荧光探针,扩增目标片段长度为61bp,引物HLV-F序列:CGTGGAACGGCTCCTTCTT;引物HLV-R序列:AGAGTTGTATCCACCGGGTAGTTT;探针HLV-P序列:CACCAGCCGGAGTT,该探针的5'含有FAM报告荧光染料,扩增目标片段的核苷酸序列如SEQIDNO:4所示;检测方法包括总RNA的提取和实时荧光PCR反应,该RT-PCR反应是引物扩增与探针检测同时进行,整个检测过程完全闭管,不需PCR后处理,消除了PCR产物的污染,减少了检测步骤,节省了时间,并且对啤酒花潜隐类病毒特异和敏感;因此本发明提供一种操作灵敏、快速、准确的检测啤酒花潜隐类病毒的检测试剂及方法。 |
申请公布号 |
CN102382903A |
申请公布日期 |
2012.03.21 |
申请号 |
CN201110319087.5 |
申请日期 |
2011.10.20 |
申请人 |
中华人民共和国北仑出入境检验检疫局;宁波检验检疫科学技术研究院 |
发明人 |
郭立新;段维军;闻伟刚 |
分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C12R1/94(2006.01)N |
主分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I |
代理机构 |
宁波奥圣专利代理事务所(普通合伙) 33226 |
代理人 |
程晓明 |
主权项 |
啤酒花潜隐类病毒的实时荧光RT PCR检测试剂,包含一对特异性引物和一条特异性荧光探针,扩增目标片段长度为61bp,其特征在于引物和探针序列为:引物HLV F: 5' CGTGGAACGG CTCCTTCTT 3';引物HLV R:5' AGAGTTGTAT CCACCGGGTA GTTT 3';探针HLV P:5' CACCAGCCGG AGTT 3',该探针的5'端含有FAM报告荧光染料,3'端为含有不发荧光的淬灭基团并具有MGB分子;扩增目标片段的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。
|
地址 |
315800 浙江省宁波市北仑区长江南路219号 |