基于纳米微粒的生物标志物的化学发光检测方法及应用

摘要

本发明属生物检测技术领域，涉及重大疾病血清等生物样本中标志物的检测方法，具体涉及一种基于纳米微粒的生物标志物的化学发光检测方法及应用。本发明方法中，在聚苯乙烯96孔板上共价固定特异性识别单克隆抗体，与相应的标志物结合，再与针对该标志物的适配体修饰的金纳米微粒进行夹心反应；用NH2OH/HAuCl4放大后，进行标志物的高灵敏度化学发光检测。本发明方法能够识别、检测多种重大疾病标志物。尤其能为临床肿瘤等重大疾病的早期诊断，提供高灵敏度血清等生物样本中标志物辅助判断依据。可进一步制备临床肿瘤等重大疾病的早期诊断的试剂盒。

主权项

基于纳米微粒的生物标志物的化学发光检测方法，其特征在于，使用聚苯乙烯96孔板作为载体结合包被抗体，与标准溶液或者生物样本中的标志物结合后，加入适配体修饰的金纳米微粒，形成三明治复合物，经NH2OH/HAuCl4放大后，进行化学发光定量测定，其包括步骤：1)将包被抗体结合到聚苯乙烯96孔板上制备载体抗体复合物，封闭备用；2)制备金纳米微粒；3)制备链霉亲合素修饰的金纳米微粒；4)制备针对目标抗原适配体DNA修饰的金纳米微粒；5)NH2OH/HAuCl4放大后，加入鲁米诺、AgNO3底物进行化学发光测定。