一种高效纯化金属离子结合蛋白的离子交换层析分离纯化方法

摘要

本发明一种高效纯化金属离子结合蛋白的离子交换层析分离纯化方法，其步骤为：选取含有金属离子结合蛋白的待分离物料，添加沉淀剂进行沉淀粗分离获得蛋白混合物。在蛋白混合物中添加适量的蛋白结合金属离子，以保持目标蛋白的三级结构。将处理所得蛋白混合物进行离子交换层析分离操作，并在层析缓冲液中添加适量的蛋白结合金属离子，由于该金属离子辅基可以有效地保持目标蛋白的天然结构，因此可以有效地提高目标蛋白与杂蛋白在离子交换层析中的分辨率。进一步通过凝胶过滤层析可以得到高纯度、高回收率的金属离子结合蛋白的纯品，生产工艺稳定，适于规模化生产。

主权项

高效纯化金属离子结合蛋白的离子交换层析分离纯化方法，其步骤包括：1)选取含有金属离子结合蛋白的待分离原料，沉淀离心去除脂类等杂质后收集上清液获得蛋白混合物；2)在所得蛋白混合物中添加适量的蛋白结合金属离子；3)选择不与蛋白结合金属离子沉淀的缓冲液作为离子交换层析缓冲液；4)在离子交换层析缓冲液中添加适量的蛋白结合金属离子；5)将蛋白混合物经过离子交换层析和凝胶过滤层析联用的组合层析，分离得到金属离子结合蛋白。