一种哺乳动物细胞的灌流培养方法

摘要

本发明涉及到一种哺乳动物细胞大规模培养的灌流操作方法，适合生产重组蛋白的哺乳动物细胞培养，更适合生产TNFR-Fc融合蛋白的哺乳动物细胞的培养。该方法具有以下特点：(1)工程细胞传代扩增过程中的逐级放大；(2)工程细胞在5L发酵罐中的培养；(3)大规模培养后期通过降低培养温度、降低pH值、降低转速及调节灌注速率提高蛋白表达量。本发明工艺延长了生产周期，提高了细胞密度、提高了细胞活力，极大的提高了目的蛋白的表达量。

主权项

一种哺乳动物细胞培养的灌流操作方法，包括如下步骤：(1)将目标细胞株在初始培养基中进行逐级放大培养阶段，和(2)在发酵罐中进行细胞培养阶段，其特征在于细胞培养阶段培养初期至细胞对数生长期的温度为36‑37℃、pH为7.1‑7.2、搅拌转速为150rpm；当细胞密度达到8×106cells/mL时，调整温度为31‑33℃、调整pH为6.9‑7.0、调整搅拌转速为80‑100rpm。